应用酵母双杂交系统筛选新基因Collectrin相关蛋白研究.pdfVIP

ScienceResea 生命科学研究Life rch ·89· 应用酵母双杂交系统筛选 新基因Collectrin相关蛋白① 张艳玲，张宏，梁秀彬，侯平，王海燕 (北京大学第一医院肾内科，北京100034) [摘 要]目的：应用酵母双杂交系统筛选与新基因Collectrin相互作用的蛋白，为该基因的功能 AHl09，Western Blot证实蛋白表达，进行毒性和自激活检验，与转化了成人肾脏cDNA文库的 达，对酵母细胞无毒性，不存在自激活现象。共筛选到5个与细胞代谢有关的蛋白。结论：Coilec— trin可能通过与细胞内某些酶类相互作用而影响细胞代谢，酵母双杂交结果为新基因Collectfin的 功能研究提供了重要线索。 [关键词]Colleetrin基因；相互作用蛋白；酵母双杂交 for Collectrin。-interacting Screening proteins inadulthuman kidneybyyeast—two-hybridsystem ZHANG Hong，LIANGXiu-bin，HOUPing，WANGHai—yan Yan-ling，ZHANG of First 100034，China) (DepartmentNephrology，TheHospital，BeringUniversity，Beijing screenfor withnovel EAbstract]Objective：Toproteinsinteracting gene strainAHl09wastransformedwith wasutilized yeast Collectrin-pGBKT7／e-myc，andyeast-mating toscreenfor withCollectrinin human cDNA interactingproteins pretransformedkidney library．Re— was andtherewasnoself-activationand OnAHl09．Five sults：Collectrinexpressed toxicity protein thatinteractwith activator proteins Collectrin，includingsphingolipid acid XAT2，mitochondrionandmetallothionein2A transporter gene synthetasegene。amino gene wereidentified．Conclusion：TheDovel Collectrininteractwiththe gene may proteins，whichmay with