流式细胞仪课程义.pptVIP

仪器基本组成 流路 流动室 鞘液SHEATH 样本流SAMPLE 单细胞悬液5?105-1?106个/ml 光路 光源 滤片 光电倍增管PMT HV 电路 放大电路HV及GAIN 增益 A/D转换 统计 计算机 流路 流式细胞仪光路图 细胞凋亡研究 1. 鉴别凋亡与坏死: Annexin Ⅴ/PI 2. 测定凋亡率:Annexin Ⅴ、Apo 2·7、TUNEL 3. 研究凋亡触发机制：Caspase、Fas及FasL bcl-2/bax 4. 多参数分析凋亡是趋势 热门研究－(肿瘤)干细胞 肿瘤组织无限制的增殖在于肿瘤干细胞的存在 目前研究的肿瘤干细胞来源于前列腺、乳腺等肿瘤 肿瘤干细胞数量稀少，常规方法很难检测 目前研究发现，肿瘤干细胞和正常细胞在HOECHEST 33342染料摄取方面有重大差别 故流式细胞仪是分析和检测肿瘤干细胞的重要工具 干细胞能表达ABCG2泵蛋白，在HOECHST 33342染色时能将该染料泵出，因此分析不能被该染料染色的细胞群时可以发现一群不能染色的细胞既是干细胞，因此能够在众多肿瘤细胞中区分出肿瘤干细胞。 肿瘤干细胞中的研究应用-Hoechst 33342 side population Hoechst Hoechst+Vera. Side Population Cells G1 S phase G