基层血站开展血液核酸筛查的必要性及可行性分析.docVIP

精品论文 参考文献 基层血站开展血液核酸筛查的必要性及可行性分析 郭超群 李运琴 来祝檩 　　（河南省焦作市中心血站 454000） 　　【摘要】目的 探讨基层血站开展血液核酸筛查的必要性及可行性。方法 就NAT在基层采供血机构的开展与应用特点等方面进行分析 结果 开展核酸检测可有效地缩短窗口期，从而减少输血风险。结论 根据核酸检测在基层采供血机构的应用特点，应统筹规划血站核酸检测实验室，重视核酸检测工作的全面质量管理，建立人员培训机制，进一步完善现有检测模式加核酸检测模式下的实验室质量运行体系，以提高血液检测的灵敏度和特异性，进一步保障血液安全。 　　【关键词】 基层血站 核酸筛查 血液安全 　　【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）09-0084-02 　　目前，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行病毒抗原或抗体的检测是采供血机构普遍采用的筛查策略，随着试剂灵敏度的不断提高，经输血传播病毒的风险已降至很低，但由于免疫学方法的局限性，漏检的现象仍会发生，使临床用血安全存在隐患。因此，越来越多的采供血机构开始在血液筛查中引入核酸扩增检测技术（NAT）。我国从2010年开展血站核酸检测试点工作，2012版血站技术操作规程开始把核酸检测技术纳入血液筛查策略，鼓励有条件的地区和单位率先开展核酸检测。据初步统计，截至目前，全国共有53家血站利用核酸检测技术对血液进行筛查。2013年5月，国家卫生和计划生育委员会发出通知，要求2013年～2015年，全面推进血站核酸检测工作，并公布具体实施方案。方案提出，到2015年，血液筛查核酸检测基本覆盖全国。本文就NAT在基层采供血机构的开展与应用特点等方面进行分析，探讨开展NAT血液筛查的必要性及可行性。 　　一、核酸检测原理 　　NAT是一系列直接检测病毒核酸技术的总称。主要原理是使用一些物理、化学和生物学方法，通过靶位核酸直接扩增或扩增其附带信号的方法，让看不见的极微量的核酸变成直观的光电和可视信号，从而判断标本中是否存在相应的病原体。[1]目前适用于血液筛查并能满足高灵敏度要求的扩增技术主要有PCR和TMA技术。PCR技术主要由引物、DNA聚合酶、原料dNTP、模板和镁离子等基本要素组成。通过加热变性、退火、延伸3个反应步骤的不断循环，完成模板DNA的扩增放大。[2]TMA是利用逆转录酶和多聚酶的共同作用，在等温条件下扩增的反应系统。 [3] 　　二、核酸检测的必要性 　　安全输血是指从采血到输入至患者体内的整个过程中的安全保障，血液安全不仅关系到受血者的身体健康和生活质量，而且对预防经血传播疾病的发生，保障社会稳定均具有重要意义。但由于免疫检测的窗口期、病毒变异、免疫静默感染等因素造成的漏检往往在所难免，这就给输血安全带来较大的隐患。 　　国外早在20世纪90年代即开始将NAT用于血液筛查，国内自2000年开始有献血者血液核酸筛查的研究报道，2010年全国医政工作会议将15所采供血机构确立为我国内地首批核酸检测试点单位，标志着我国输血传染病的血液筛查工作又向前迈了一步。NAT在血液筛查中的意义主要是：1.减少窗口期长造成的漏检；2.减少病毒变异酶免试剂检测不出的漏检；3.减少隐匿性感染的漏检；4.减少试剂灵敏度低造成的漏检。核酸检测平均可将乙肝、丙肝和艾滋病病毒检测“窗口期”由原来的56、82、22天缩短至33、22、11天，分别缩短40%、89%和50%。另外，NAT还能检出免疫学方法尚无能为力的免疫静默感染、乙肝隐匿性感染、病毒变异株感染等，可进一步保障血液安全。 　　三、核酸检测在基层采供血机构的应用 　　NAT在我国采供血机构中仍处于起步阶段，但在血液筛查中的应用具有重要意义。相比临床而言，对试剂灵敏度的要求更高，因采供血机构的检测目的是为了获得安全的血液，主要强调的是试剂的灵敏度和特异性，并且对实验室的规范操作要求更高。因此，在基层采供血机构中开展NAT，应从以下几方面入手。 　　1. 严格核酸检测实验室的设置 　　开展核酸检测的血站要建立起符合标准的实验室，规范化的检测流程，做好核酸检测实验室质量控制和人员的技术培训，积极探索建立适合血站的核酸检测模式和管理体系。注重规范的操作和严格的防污染措施，避免样品间的交叉污染和扩增产物的污染。在设备和试剂的选择上应考虑自动化程度高、试剂灵敏度高、重复性、特异性好、操作方便等多方面。 　　2. 重视质量管理 　　2.1建立完善的样本留样和处理程序，样本留样和处理是核酸检测质量控制体系中的重要环节，否则在检测之前病毒核酸已降解，造成假阴性的检测结果。