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ox-LDL经由LOX-1受体对PPARγ-LXRα-ABCA1通路激活的作用研究
ox-LDL经由LOX-1受体对PPARγ-LXRα-ABCA1通路激活的作用研究
余承洁 李敬达 修志龙 刘庆平
辽宁省糖脂代谢重点实验室大连大学生命科学与技术学院 大连理工大学生命科学与技术学院
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摘????要:
目的 探讨氧化型低密度脂蛋白 (ox-LDL) 经由血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1 (LOX-1) 受体对PPARγ-LXRα-ABCA1通路激活的作用。方法 浓度梯度ox-LDL (040 mg/L, 12 h) 刺激J774A.1巨噬细胞, 检测LXRα、ABCA1的表达。构建293T细胞LOX-1过表达的PPARγ双荧光素酶报告基因系统, 激光共聚焦及Western blot检测LOX-1的分布与表达, 双荧光素酶报告基因系统检测PPARγ的转录活化情况。对J774A.1巨噬细胞分别进行LOX-1 siRNA和PPARγsiRNA沉默, ox-LDL (30 mg/L, 12 h) 孵育后检测LXRα、ABCA1蛋白的表达。结果ox-LDL可显著上调J774A.1细胞LXRα和ABCA1的表达 (P0.01, n=3) 。LOX-1过表达的PPARγ双荧光素酶报告基因系统检测显示ox-LDL能够通过LOX-1增加PPARγ的转录活性;对J774A.1巨噬细胞分别进行LOX-1siRNA、PPARγsiRNA沉默后发现, LXRα和ABCA1的表达均显著降低 (P0.01, n=3) 。结论 ox-LDL可通过LOX-1受体激活PPARγ转录活性, 从而上调LXRα、ABCA1蛋白表达, 完成PPARγ-LXRα-ABCA1信号通路的激活。
关键词:
血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1; 氧化型低密度脂蛋白; 过氧化体增殖物激活型受体γ; 肝X受体α; 三磷酸腺苷结合盒转运体A1;
作者简介:余承洁, 硕士研究生, 研究方向为动脉粥样硬化细胞分子生物学;E-mail163.com。
作者简介:刘庆平;博士, 教授, 研究方向为动脉粥样硬化细胞分子生物学, E-mail为qingpingliu40@126.com。
收稿日期:2017-02-07
基金:国家自然科学基金项目
Ox-LDL activate PPARγ-LXRα-ABCA1 to transcript by LOX-1 receptor
YU Cheng-Jie LI Jing-Da XIU Zhi-Long LIU Qing-Ping
Key Laboratory of Glucolipid Metabolism in Liaoning Province College of Life Science and Technology, Dalian University; College of Life Science and Technology, Dalian University of Technology;
Abstract:
Aim To investigate the effect of oxidized low density lipoprotein (ox-LDL) on activation of PPARγ-LXRα-ABCA1 pathway via lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1 (LOX-1) receptor. Methods The expression of liver X receptor α (LXRα) and ABCA1 was detected by stimulating J774 A.1 macrophages with concentration gradient ox-LDL (0 ~ 40 mg/L, 12 h) , the expression of LOX-1 was detected by laser confocal microscopy and Western blot, the transcriptional activation of peroxisome proliferators-activated receptor γ (PPARγ) was detected by double luciferase reporter gene, the expression of LXRα and ATP-binding cassette transporter A1 (ABCA1) protei
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