Experimental Studies of SVF on labeling with DiImultilineage differentiation the cellular compatibility of type Ⅰ collagen scaffold in vitro.docx

20j二。+’、i．．‘、。‘≥ 。、i÷ ：，’：1一z、 ，、。。燕。÷。西蔓奠：j、i：t：： ．： #芋_、，：，一；’等、j ÷r自fli投稿摘要2．3图像分析处理将血管瘤增生期、退化期以及正常皮 预后的信息。Cyclin E在众多人类肿瘤中异常表达。在大 肤组织的切片置O—LYMPUS显微镜下(400x)，对所测 多数肿瘤的研究中。用免疫标记的方法确认cyc|in E在 视野进行准确定位后由摄像系统提取数值化细胞图像 核内表达。但胞浆染色被观察到的越来越多．其意义仍 输入HPIAS—1000多媒体彩色病理图像分析系统(同济 不清楚。虽然cyclin E蛋白在胞浆内合成和降解．通常情 千屏影像公司)进行处理．每例随机选取5个完整而不 况下快速转运至核内发挥作用．cyclin E在胞浆内的聚重叠的视野进行定量分析．测定免疫组化反应阳性颗粒 集可能反映了合成增加、降解减少或核转运障碍[6]。我 的平均光密度和面积的百分率，取每张切片的均值作为 们过去用免疫组织化学的方法检测了不同时期的血管 该例的测量值。瘤和正常皮肤血管组织中cvelinE的表达．结果’征明增 2．4统计学方法用SPsSll．5统计软件对3组样本阳性颗 生期血管瘤cycliaE表达水平高于退化期，差异有显著粒的平均光密度和阳性面积率做单因素方差分析和 性(P0．01)，增生期血管瘤cychnE表达水平高于正常SNK(q)检验．检验水准a为0．05。皮肤组织(PO．05)。说明cychnE的高表达与血管瘤的3结果发生有关。我们此次采用原位杂交的方法检测了同一批3．1}IE染色增生期血管增组织中可见大量增生活跃的内 标本．利用含生物素标记寡核苷酸探针的原位杂交具有 皮细胞，内皮细胞核肥大而淡染。退化期血管瘤组织中 特异性强、敏感性高、定位精确、定量可靠的优点．可完 血管内皮细胞明显减少．形成大量的毛细血管腔，m管 整的保持组织细胞的形态结构，能准确地反映组织细胞 问结缔组织增多．内皮细胞核扁平。的相互关系及功能代谢状态的特点．探讨evclinE与血 3．2原位杂交增生期血管瘤内皮细胞胞膜和胞浆有较密 管瘤病程的关系。结果与免疫组织化学相同．增生期血集蓝色颗粒；退化期血管瘤内皮细胞胞膜和胞浆蓝色颗 管瘤cyclinEmRNA表达水平高于退化期(PO．01)，增 粒不明显：正常皮肤组织血管内皮细胞胞膜和胞浆无蓝 生期血管瘤cvclinEmRNA表达水平高于正常皮肤组织( 色颗粒沉积。经单因素方差分析，3组样本 P0．05)，差异有显著性。并H证明cyclinEmRNA于血cyclinEmRNA的表达差异有显著性意义(P0．05)。经 管瘤增生早期就开始表达．至血管癌增生期 SNK(q)检验，增生期组与退化期组、增生期组与正常 cychnEmRNA的表达达到高峰。可见cyclinE和 皮肤组的阳性面积率和平均光密度的差异有显著性意 cyclinEmRNA的表达与血管瘤的增生是一致的．这说明 义(PO．01)：退化期组与正常皮肤组上述两指标的差异 cyelinE的表达在血管瘤增生期组织中增加具有规律性． 无显著性意义(P0．05)。cychnE是随着血管瘤的增生不断表达增加的。实验证明4讨论高表达cyclinE的为内皮细胞。，血管瘤内皮细胞的过度 血管瘤的自然病程包括增生期、退化期和退化完成期3 增殖无疑是血管糟增殖期最具特征性的变化．同时也是 个阶段。目前血管瘤的发病机制还不完全清楚[1j，血管 血管瘤发生、发展的基础。瘤内皮细胞的过度增殖无疑是血管瘤增殖期最具特征性的变化，同时也是血管瘤发生、发展的基础。Mulliken Experimental Studies of SVF on labeling [2]根据其内皮细胞的行为特点将其分为增生期和退化 with Dil，multilineage differentiation，the期。增生期血管瘤表现为肥大、功能活跃的内皮细胞增cellular compatibility of type I coHagen生，基底膜增厚、呈多层．形成含有毛细血管大小的管腔scaffold in vitro或无腔的肿块，内皮细胞DNA合成增强。取此时期的内Li Liqun，Gao Jianhua，Cha Penni，Lu Hua，Pan皮细胞进行体外培养可形成毛细血管样结构。退化期血Shengsheng，Ni Bmgting，Pang．管瘤表现为内皮细胞数目减少，血管腔增大，血管问有Department of Plastic Surgery，The first affiliated hospital of结缔组织和脂肪细胞浸润．此期内皮细胞DNA合成