精品电镜超薄切片3.pptVIP

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  • 2017-12-24 发布于湖北
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精品电镜超薄切片3

③甲酸铀 特别是用于螺旋对称的病毒颗粒。一般配制成0.5-1%的水溶液,临用前配制并调pH至5.5。 ④ 钼酸铵配制成2%~3%水溶液,使用时用醋酸铵将pH调至7.0~7.4之间。 注:负染色液的PH值对负染的效果影响较大,一般偏酸的染液会得较好的效果,越是偏碱效果越差,碱性染液往往造成标本的凝聚变形。通常用的钨酸盐的PH值为6.0-7.0,比较获得较好的效果。 * (6)? 负染色的操作方法 ①??? 滴染法: ②??? 漂浮法: ③??? 喷雾法 应注意的问题:①负染的时机问题。②提纯的病毒最好1:10-1:100稀释。悬浮病毒的缓冲液也尽可能地稀释一些。③负染用的支持膜疏水性的处理。(用离子溅射仪处理)。④负染中常遇到颗粒悬浮样品的凝聚现象。办法可以通过2000-5000rpg离心和调节悬浮PH值到中性和偏酸性来解决。 * 五、电镜冷冻制备技术 应用:在细胞化学、免疫电镜、X射线微区分析以及可溶性物质的放射自显影研究等方面,均得到了比较广泛的应用。 (一)过程。这一过程受样品含水量和水分存在的形式,冷冻速度、冷冻温度、细胞冷冻点和再结晶点的温差等因素的影响。 * (二)?? 问题 1、??? 冰冻过程中冰晶形成及其后果。 ①? 冷冻的速度决定了冰晶的大小。300oCV/秒冰晶颗粒为100nm,500/秒为50nm,800oC/秒为30nm,最好104oCV/秒 ②? 冷

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