十三种利尿剂的高效液相色谱测定方法.docx

十三种利尿剂的高效液相色谱测定方法1 , 2 , 朱绍棠 2 , 王超 1 , 赵明 1 , 彭师奇 1秦( 1. 北京大学 药学院 , 北京 100083 ; 2. 国家体育总局运动医学研究所 兴奋剂检测中心 , 北京 100029)摘 要 : 对近几年国际奥委会医学委员会公布的禁用表中新增药物及一系列利尿剂的相关化合物进行了研究 , 比较了不同的提取方法及回收率 , 研究了几种药物的排泄情况 ; 建立了同时分析 13 种利尿剂的高效液相 色谱测定方法 , 检出限小于 5 ng。关键词 : 利尿剂 ; 高效液相色谱 ; 检测 ; 尿中图分类号 : R983. 1文献标识码 : A文章编号 : 1004 - 4957 ( 2003) 01 - 0041 - 04国际奥委会规定 , 使用兴奋剂违反体育和医学科学的伦理道德 。 按照国际奥委会医学委员会的定义 , 使用兴奋剂包括 : 使用属于禁用药物类的有关物质及使用各种不同的禁用方法 1 。 利尿剂属 于兴奋剂中的一种 2 , 自从 1989 年冬奥运会宣布禁用利尿剂以来 , 利尿剂一直是监控的重点 。 这不 仅由于利尿剂在涉及重量级别项目 (如举重 、拳击等) 中可用于减轻运动员体重 , 而且还常被作为一 种稀释尿液掩盖其他禁用药物的手段 。 因此除比赛期间外 , 在赛外抽查时也必须检查利尿剂 。由于社会上总有一些违背体育道德的人不断发掘药物用于体育比赛中 , 因此在国际奥委会公布的禁用表中 , 每年都会有一些新的药物出现 。 近年来 , 禁用表中也有不少新的利尿剂出现 , 如吲满 速尿 、克罗帕米 、利多速尿和托拉沙米等 。 另外 , 按照国际奥委会对兴奋剂的定义 , 未列入表内的 相关化合物也同属于禁用范畴 。 为及时跟上国际步伐 , 尽早建立和完善利尿剂的检测方法 , 我们对 新增药物及系列利尿剂的相关化合物进行了研究 。 有关这些药物的高效液相色谱( HPLC) 检测方法 及气相色谱 - 质谱联用 ( GC - MS) 方法有部分报道 3 , 4 , 但缺乏系统分析的资料 。 作者首次用 HPLC方法同时检测了人尿中 13 种利尿剂 , 建立了 HPLC 的筛选方法 。1实验部分1 . 1 药品与试剂吲 满 速 尿 (i ndapamide ,IND)的 对 照 品 来 自 Sigma ; 克 罗 帕 米 (clopamide ,CLOP) 、利 多 速 尿( xipamide , XIP) 、托拉沙米 ( torasemide ,TOR)由韩国兴奋剂实验室提供 ; 吡咯它尼 (piretanide , PIR) 、聚噻嗪 (polythiazide , POL Y) 、氟甲噻嗪 (flumethiazide , FLU) 、三氯噻嗪 ( trichlomethiazide , TRI) 、甲氯噻嗪 ( methylclothiazide , METH) 、氢氟噻嗪 ( hydroflumethiazide , HF) 、环噻嗪 (cyclothiazide , CYC) 、依托唑啉(etozoli ne , ETO) 和喹噻酮 ( quiethazone , QUI) 由加拿大 INRS -Sante 实验室提供 。收稿日期 : 2002 - 03 - 08 ; 修回日期 : 2002 - 09 - 24作者简介 : 秦( 1967 - ) , 女 , 安徽淮南人 , 助理研究员 , 博士研究生 .( 1.Institute of Radiation Medici ne , Academy of Military Medical Sciences , Beiji ng100850 , Chi na ; 2. National100850 , Chi na)Centre of Biomedical Anal ysi s , Academy of Military Medical Sciences , Beiji ngAb stra ct : The effects of recombinant human interferon-γ( rhIFN-γ) and recombi nant human tumor necrosis factor -α( rh TNF-α) on p hosp horus metabolism i n human l ymp homa leukemia cell li ne Molt- 4 were i nvesti gated by usi ng31P NMR. 31P NMR spectra of Molt- 4 cells consist pri marily of adenosi ne trip h