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蒲葵子的含药血清体外抗肿瘤作用的实验研究 蒲葵子的含药血清体外抗肿瘤作用的实验研究 曾春晖杨柯郑作文广西中医学院530001南宁市明秀东路179号 摘要目的:观察蒲葵子的含药血清体外抗肿瘤作用.方法:采用MTF法,观察蒲葵子提取物的含药血清 对肉瘤细胞(s.∞)和肝癌细胞(H)增殖的抑制作用.结果:蒲葵子提取物的20%含药血清在体外对s.舳细胞和 H细胞有明显的抑制作用,抑制率分别为41.15%,47.43%.结论:蒲葵子含药血清能抑制S.舳肉瘤细胞和 H22肝癌细胞的增殖. 关键词蒲葵子;肉瘤细胞S18o;肝癌细胞H;抗肿瘤作用;血清药理学 中图分类号:R285.5文献标识码:A文章编号l1003—0719(2007)01—0058—02 蒲葵L/v/stormchinens/sR.Br.为棕 榈科植物,药用叶,种子或根.其性平味 淡,甘涩,具有止血,抗癌等功效,主治外 伤出血,血崩等….蒲葵子的成分为酚 类,还原糖类,鞣质及甘油三酯.有资 料记载葵树子抗癌,但尚未见相关 试验研究报道,故笔者对蒲葵子提取物 含药血清的抗肿瘤作用进行初步研究, 现报道如下. 1实验材料 1.1细胞肉瘤S舯细胞(广西中医药 研究所惠赠);肝癌H篮细胞(广西民族医 院惠赠);以上瘤株均于动物身上以腹水 形式传代保种. 1.2动物昆明种小自鼠,体重22～ 26s,雌雄兼用,由广西中医学院实验动 物中心提供,合格证号:桂医动字第 11004号. 1.3药物蒲葵子经药用植物教研室 韦松基副教授鉴定为棕榈科植物蒲葵 如ch/nens/sR.Br.的干燥种子,蒲 葵子粗提取物由本院中药化学教研室提 供. 1.4试剂RPMI1640培养基(GIBCO 公司产品,批号:1243098);新生牛血清 (NBS,杭州四季青公司,批号:050910); MTr(~京拜尔迪生物公司分装,A/nl~sco 0793);二甲基亚砜[DMSO.生工生物工程 (I-海)有限公司,批号:54186】. 1.s器材二氧化碳培养箱(美国For- 眦公司);倒置显微镜(德国Leica公司); 酶标仪(奥地利Sunrise公司);吉尔森微 量移液器(法国Pipetman公司);BDX一 35BI型座式自动电热压力蒸汽灭菌器 (上海申安医疗器械厂). 2实验方法与结果 2.1S.细胞,H细胞体外培养分 别取接种后第8天的瘤源动物,颈椎脱 臼处死,用75%酒精浸泡,于超净工作台 中用一次性注射器抽取lml腹水置于 4m]不含血清的RPMI1640溶液中.滴管 冲吸均匀,离心(2000rpm,10rain),重复2 次,最后将细胞重悬于含10%新生牛血 清的RPMI1640培养液中,制成细胞悬 液.台盼蓝拒染,计数活细胞,要求活细 胞达95%以上.用含10%新生牛血清的 RPMI1640培养液将sso细胞,H22细胞悬 液稀释为1X10个/ml后接种于96孑L培 养板,100tq/~L,平行设空白对照孑L(只加 培养液,不加细胞).接种后置于37℃, 5%CO的二氧化碳培养箱中预培养24h, 然后进行以下体外实验. 2.2含药血清的制备取小鼠10只, 体重22～26g,雌雄兼用.分为2组:空白 血清组(灌肠给予生理盐水),蒲葵子提 取物血清组(按每次2吨生药/kg剂量灌 肠给药).每天给药2次,连续3天,末次 给药后1h,摘眼球取血,～鼠一管,离心 分离血清,56℃灭活30min.分别用不含 血清的1640培养液稀释成40%浓度,分 别过滤,4℃保存备用. 2.3含药血清对肿瘤细胞的抑制作用 取含药血清加入已进行体外预培养24h 肿瘤细胞的96孑L培养板中,每鼠3孔,含 药血清终浓度为20%.并用同浓度空白 血清作对照.继续培养48h,然后加入 0.5%MqT溶液,1l/孑L,继续培养4h. 2000rpm离一tL,15rain,弃去上清液;每孔 加入200tqDMSO,轻振10rain后在550nm 波长处用酶标仪测OD值.应用SPSS14.0 统计软件进行组问t检验,并按以下公 式计算抑制率.结果见表1. 抑制率%=(空白血清组OD值均数 一 蒲葵子提取物血清组OD值均数)/空 白血清组OD值均数X100%. 表1含药血清对肿瘤细胞的抑制作用 注:与空白血清细胞组比较,①Plt;0.05 结果显示:蒲葵子提取物灌胃给药 后,分离的含药血清对St∞细胞和H细 胞均有明显抑制作用.20%含药血清对 其抑制率分别为41.15%,47.43%,显示 出较好的抑瘤活性. 广西中医药2007年2月第30卷第1期 3讨论 恶性肿瘤是人类最主要的死亡原因 之一,治疗难度大,且发病率一直呈上升 趋势,据世界卫生组织预测,至2020年 随世界人口达8O亿,将有2000万新发 癌症病例,其中死亡人数将达120