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WATERS公司的UPLC-TQD培训资料 MS_7_校正
COMPANY CONFIDENTIAL Rev. (mmddyy) (Course Name) COMPANY CONFIDENTIAL 四极杆系统的校正 校正 – 硬件 vs 软件 硬件的校正是由原厂和维修工程师进行的,可以保证名义质量数的准度。 对于某些应用,硬件校正是足够的。 对于需要最高的质量准确度的情况,用户可以通过Masslynx 软件进行软件校正,并将系统的质量校正变得更为精确。 在识别未知物以及MRM 和 SIR 分析时,确认选择了准确的质量数,这是非常有用的。 校正中的可变因素 环境的改变 温度或者湿度的改变 随着时间变化而发生的电源变化 改变了分辨率设置 在仪器的校正范围内工作是非常重要的! 如同您不愿意在定量曲线之外进行定量计算一样,您也不希望在您的质量数校正曲线之外工作。 仪器的校正曲线(Calibration Curves) 一台三重四极杆的仪器需要有三种校正曲线:对于MS1和 MS2, 有六条校正曲线 静态校正(Static calibration)可以使四极杆质量分析器准确地定位于感兴趣的特定质量数上。 (例如 调谐,SIR和MRM). 扫描校正(Scanning calibration) 保证在扫描采集中峰采集的质量数准确性。 (例如 全扫描 Full Scan). 扫描速度补偿(Scan speed compensation calibration):当仪器快速扫描是,补偿系统中的“滞后时间” 。 质谱仪的每一种校正都需要参考溶液。不过,MassLynx 可以在一个步骤中执行所有必须的校正。 校正步骤 每个参考溶液的质谱图都是已经采集好的。采集过的质谱图中的峰与储存于参考文件表格中的预期理论质量数相匹配。A mass spectrum of a reference solution is acquired. The peaks in the acquired spectrum are matched against a table of expected theoretical masses which are stored in a Reference File. 参考文件中的每一个峰与采集的质谱图中对应的峰相匹配。Each peak in the Reference File is matched to a corresponding peak in the acquired spectrum file. A calibration curve is created that ‘adjusts’ the masses of the experimantal spectral peaks to the theoretical masses of peaks as listed in the reference file. 一般注射泵Typically a Syringe Pump capable of delivering a slow, steady flow rate of 5 or 10 μL/min is used with an Infusion Kit consisting of a fused silica capillary tubing with appropriate fittings. 参考溶液(Reference Solutions) 参考溶液用于在一个宽mass 范围内产生多离子。 质谱仪可以在此范围内被校正。 常用的参考溶液: PEG, PPG NaI/CsI, NaI/RbI Horse Myoglobin, Poly Alanine 在此章节的最后有一些常用的参考溶液的配制方法。 参考文件Reference File 参考文件中包括参考溶液产生的质谱峰的信息,Masslynx软件将在校正过程中对其进行搜索并匹配之。 该文件既有mass( m/z )信息,也有这些峰预期的强度。强度信息在校正 LC/MS 系统时,通常是不用的。 参考文件置于Masslynx软件的Ref 文件夹下。 参比文件都是 text 文本文件,可以用Notepad 写字板浏览之。 参比文件必须具备一个“.ref” 的扩展名。 MS 校正的方式 从调谐页面进入,选择校正-仪器校正 使用自动调谐中的校正功能 对于SQD、TQD,可以使用IntelliStart – Instrument Setup功能进行仪器校正 校正仪器Calibrate Instrument 校正窗口 校正的参考文件 校正的参考文件 NaI 参考溶液的特性 NaI 基质的溶液有Na、I的优势,并有单一同位素。系统不必区分来自于不同同位素的各组峰。 solutions have the advanta
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