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重组麦芽糖转葡萄糖基酶工程菌发酵条件的优化
※生物工程 良 品科 学 2011，Vo1．32，No．19 141
重组麦芽糖转葡萄糖基酶工程菌
发酵条件的优化
胡耀辉 ，王 丹 ，朴春红，于寒松，刘俊梅
(吉林农业大学食品科学与工程学院，吉林长春 130118)
摘 要：对重组麦芽糖转葡萄糖基酶工程菌的发酵条件进行优化，通过单因素试验确定该菌株产麦芽糖转葡萄糖基
酶的最佳发酵培养基为：糖蜜0．025g／mL、胰蛋白胨0．015g／mL、MgSO4·7H20与KzHP04的质量为7：1、FeSO4·
7Hz00．5g／L；以葡萄糖氧化酶法为指标测得最佳摇瓶发酵条件为：装液量 100mL／250mL、转速200r／min、接种
量5％、初始pH7．0、最佳温度 37℃、诱导阶段OD600=0．6、诱导温度30℃、诱导时间5h、诱导剂异丙基 ．．D．
硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)浓度 lmmolL／。经优化，重组麦芽糖转葡萄糖基酶的酶活力可达950U／mL，比初始条件下
提高了近 7倍。
关键词 ：麦芽糖转葡萄糖基酶；发酵条件；优化
OptimizationofFermentationConditionsforGeneticallyEngineeredRecombniantBacteriumwithAmylomaltaseGene
HU Yao—hui，W ANG Dan，PIAO Chun—hong，YU Han·song，LIU Jun·mei
(CollegeofFoodScienceandEngineering，JilinAgriculturalUniversity，Chnagchun 130118，China)
Abstract：Theoptimalfermentationconditionsforthegeneticallyengineeredrecombinnatbacteriumwithamylomaltasegene
conservedinourlaboratorywereexploredinhtisstudy．One-factor-at-a-timeinvestigationsshowedhtathteoptimalfermenta-
tionculturemedium wascomposedof0．025g／mLmolasses，0．015g／mLtryptone，M gSO4·7H20／KzHPO4ratioof7：1，and
0．5g／LFeS04·71-12O．Theoptimalfemr entationconditionsdeterminde basedongucoseoxidaseactivitywere100mLofmedium
ina250mLflask，shakingspeedof200r／min，inoculumamountof5％，initialpHof7．0，femr entationtemperatureof37℃，addition
ofhteinducerIPTGatOD60o~m= 0．6，inductiontemperatureof30℃，inductionperiodof5handinducerconcentrationof
1mmol／L．Underhteoptimalconditions，hteamylomalatseactivitywas950U／mL，whichwasimprovedby7timescompared
wiht non—optimizationconditions．
Keywords：amylomaltase；fermentationcondition：optimization
中图分类号：Q93．335 文献标识码：A 文章编号：1002．6630(2011)19—0141·06
麦芽糖转葡萄糖基酶(CGTase，EC2．4．1．25)是细胞 微生物中分离、提纯和鉴定，通过基因修饰和改造等
内的4一．葡聚糖基转移酶，它催化 ．1，4一
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