食品中真菌的检验.pptVIP

第九章 食品中真菌的检验 -------酵母菌和霉菌的检验 （一）、采样 1、粮食(包括粮库贮粮，粮店或家庭小量存粮)样品的采集，可根据粮囤或粮垛的大小和类型，分层定点取样，一般可分三层五点，或分层随机采取不同点的样品，充分混合后，取500g左右送检。小量存粮可使用金属小勺采取上、中、下各部位的混合样品。 　 2、海运进口粮的采样：每一船仓采取表层、上层、中层及下层四个样品，每层从五点取样混合，如船仓盛粮超过10000t，则应加采一个样品。必要时采取有疑问的样品送检。 3、谷物加工制品(包括熟饭、糕点、面包等)、发酵食品、乳及乳制品以及其他液体食品，用灭菌工具采集可疑霉变食品250g，装入灭菌容器内送检。 谷物加工制品 发酵食品 （二）、样品处理（稀释） 1、以无菌操作称取检样25g(或25mL)，放人含有225mL灭菌水的玻塞三角瓶中，振摇30min，即为1：10稀释液。 2、用灭菌吸管吸取1∶10稀释液10mL，注入试管中，另用带橡皮乳头的1mL灭菌吸管反复吹吸50次，使霉菌孢子充分散开。 3、取1mL1∶10稀释液注入含有9mL灭菌水的试管中，另换一支1mL灭菌吸管吹吸5次，此液为1∶100稀释液。 （三）、培养 倒置于25-28℃温箱中，3d后开始观察，共培养观察5d。 （四）、计数报告 选取菌落数10-150之间的平板进行计数（稀释度选择和菌落报告方式参考菌落总数的测定） 在上面的检验中,要配制培养基，对培养器皿要进行清洗灭菌等处理，费时费力，因此，可用霉菌酵母菌快速检验纸片简化上面的工作。 该检验纸片可用于各类食品及饮用水中霉菌和酵母菌的计数，由霉菌营养培养基、吸水凝胶和酶显色剂等组成。与上面的传统方法相比，省去了配制培养基、消毒和培养器皿的清洗处理等大量辅助性工作，随时可以开始进行抽样检测，而且操作简便，通过酶显色剂的放大作用，使菌落提前清晰地显现出来，培养时间由一周缩短为48-72小时，非常适合于食品卫生检验部门和食品生产企业使用 。 霉菌酵母菌快速检验纸片使用方法 1．取样品25g（或mL）放入含有225mL无菌水的玻璃瓶内，经充分振摇做成1:10的稀释液，用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL，注入含有9mL灭菌水的试管内，用1mL灭菌吸管反复吸吹50次做成1:100的稀释液，以此类推，每次换一支吸管。 2．一般食品选3个稀释度进行检测，含菌量少的液体样品（如食用纯水和矿泉水等）可直接用原液检测。将检验纸片水平放台面上，揭开上面的透明薄膜，用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液1mL，均匀加到中央的滤纸片上，然后轻轻将上盖膜放下，静置5分钟。 3．用手指先沿方格区边缘刮一下，防止水外流，然后再在中间轻轻推刮，使水分在纸片方格区内均匀分布，并将气泡赶走。 4．将加了样的检验纸片每15片叠放在一起，放入自封袋中，平放在28－35℃培养箱内培养48-72小时。5．霉菌和酵母菌在纸片上生长后会显示蓝色斑点，霉菌菌落显示的斑点略大或有点扩散，酵母菌落则较小而圆滑，许多霉菌在培养后期全呈现其本身特有的颜色。选择菌落数适中（10-100个）的纸片进行计数，乘以稀释倍数后即为每克（或毫升）样品 * * 一、检验程序 采样→处理→稀释→平板分离培养→菌落计数→报告 二、操作要点 二、操作要点 （一）、采样 二、操作要点 （一）、采样 霉菌酵母菌 快速检验纸片 *