质量手册_白血病融合基因分型.docVIP

质量手册 第 章 第1页共1页 课题：白血病融合基因分型 第A版第0次修订 颁布日期：2008年7月31日 目的：白血病诊断，治疗监测、预后估计和微小残留检测等。 原理： 显微镜检查 FISH试验：荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization FISH）的基本原理是用已知的标记单恋核酸为探针，按照碱基互补的原则，与待检材料中未知的单链核酸进行特异性结合，形成可倍检测的杂交双链核酸。由于DNA分子在染色体是沿着染色体纵轴呈线性排列，因而可以将探针直接与染色进行杂交从而将特定的基因在染色体上定位。与传统的放射性标记原位杂交相比，荧光原位杂交具有快速、检测信号强、杂交特性高和可以多重染色等特点。 仪器与试剂： （1） 相关仪器 1）37℃的水浴箱 2）75℃的水浴箱 3）变性热台 4）37℃恒温培养箱 5）离心机 6）荧光显微镜 7）FISH分析软件 8）钻石笔 9）微量微液器 （2）相关试剂 1）探针（已含DAPI antifade） 2）20×SSC： 175.3g NaCl + 88.2g 柠檬酸 3）4×SSC：1 ： 5 稀释 20×SSC 4）2×SSC：1 ：10 稀释 20×SSC 5）0.4×SSC：1 ：5稀释 2×S