单管多重犚犜 犘犆犚同时检测大豆种子中三种检疫性植物 - 植物保护.pdfVIP

　 犘犾犪狀狋犘狉狅狋犲犮狋犻狅狀 实 验 方 法 与 技 术 犈狓犲狉犻犿犲狀狋犪犾犕犲狋犺狅犱牔犜犲犮犺狀狅犾狅 狆 犵狔 单管多重犚犜犘犆犚同时检测大豆种子中 三种检疫性植物病毒 １ １ ２ ３ １ １ 易汪雪 ， 宋绍 ， 吴东妮 ， 代欢欢 ， 杨翠云 ， 于 翠 　 　 　 　 　 　 （ 上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心，上海 ； 中国科学院 １． ２００１３５ ２． 　 上海生命科学研究院，上海生命科学信息中心，上海 ； 合肥师范学院，合肥 ） ２０００３１ ３． ２３０６０１ 　 　 摘要 我国大豆年进口量持续增长，快速、准确地检测进境大豆种子中可能携带的病原物是防止检疫性有害生物入 　 境传播和扩散的有效手段。菜豆荚斑驳病毒（ ）、烟草环斑病毒（ ）和番茄环斑病毒（ ）均是被大 ＢＰＭＶ ＴＲＳＶ ＴｏＲＳＶ 豆种子携带的检疫性有害生物。本研究建立了在单一 管中同时检测这 种检疫性植物病毒及大豆内源基因 ＰＣＲ ３ Ｂｄ３０Ｋ的多重ＲＴＰＣＲ方法。研究结果表明，所建立的多重ＲＴＰＣＲ方法具有较好的特异性和灵敏度，检测含 、 和 的最低浓度分别为 、 和 ／ ，从大豆种子中同时检测 种病毒 ＢＰＭＶＴＲＳＶ ＴｏＲＳＶＲＮＡ ０．４５０．００９３ ０．００４ｎ Ｌ ３ ｇμ 的最低 浓度为 ／ 。 ＲＮＡ ０．５８ｎ Ｌ ｇμ 关键词 菜豆荚斑驳病毒； 烟草环斑病毒； 番茄环斑病毒； 多重ＲＴＰＣＲ； 同时检测 　 　 　 　 　 中图分类号： ， 文献标识码： ： ／ Ｓ４３５．６５１Ｓ４３２．４１ Ａ 犇犗犐 １０．３９６９．ｉｓｓｎ．０５２９ １５４２．２０１６．０５．０１９ 　 　　 　 　　 　 ｊ 犛犻犿狌犾狋犪狀犲狅狌狊犱犲狋犲犮狋犻狅狀狅犳狋犺狉犲犲狌犪狉犪狀狋犻狀犲 犾犪狀狋狏犻狉狌狊犲狊犳狉狅犿 狇 狆 狊狅犫犲犪狀狊犲犲犱狊犫 犿狌犾狋犻犾犲狓犚犜犘犆犚犻狀狊犻狀犾犲犘犆犚狋狌犫犲 狔