慢病毒经不同途径转染小鼠眼组织的研究.docVIP

慢病毒经不同途径转染小鼠眼组织的研究 主蓥查0l1年1月第29卷第1期ChinJExpOphthalmol,JanuaP/2011,Vo1.29,No.1 [4]YangGS,SchmidtM,YanZ.eta1.Virus—mediatedtransductionofmurine retinawithadeno—associatedvirus:effectsofvira1capsidandgenomesize IJ.JVirol,2002,76:7651—7660. [5]PangJJ,LauramoreA,DengwT,eta1.Comparativeanalysisofinvivo andinvitroAAVvectortransductionintheneonatalmouseretina:effects ofserotypeandsiteofadministration『J].VisionRes.2008.48: 377—385. [6]YokoiK,KachiS,ZhangHS,eta1.Oculargenetransferwithself— complementaryAAVvectors[J].InvestOphthahnolVisSci,2007,48: 3324—3328. [7]SambrookJ,RussellDW.Molecularcloning,alaboratorymanual[M] 2mled.Woodbury:ColdSpringHarborLaboratory-Press.1989:852—897 [8]李风鸣.眼的胚胎发育与比较解剖学[M]//李凤鸣眼科全书北 京:人民卫生出版社,1996:31—67. j9;ChenM,MuckersieE,RobertsonM,eta1.Characterizationofa spontaneousmouseretinalpigmentepithelialcellIineB6一RPE07[J]. InvestOphthahnolVisSci,2008,49:3699—3706. 10SmithAJ,SchlichtenbredeFC.TschernutterM,eta1.AAV.Mediatedgene transferslowsphotoreceptorlossintheRCS pigmentosa[J].MolTher,2003,8:188—195. ? 25 [11]李海燕,赵家良,张华.腺伴随病毒介导的神经营养素4基因对视网 膜神经节细胞的转染[J].眼科研究,2007,25:533—535. [12]RollingF,ShenwY,BarnettNL,eta1.Long—termrea1.timemonitoringof adeno-associatedvirus—mediatedgeneexpressionintheratretinalJ1. ClinExpOphthahnol,2000,28:382-386. [13】RollingF,ShenWY,TabariasH,eta1.Evaluationofadeno.associated virus—mediatedgenetransferintotheratretinabyclinicalfluorescence photographylJf.HumGeneTher,1999,10:641—648. [14]HansenKA,SuginoIK,YagiF,eta1.Adeno—associatedvirusencoding greenfluorescentproteinasalabelforretinalpigmentepithelium[J]. InvestOphthalmolVisSci+2003,44:772-780. (收稿日期:201O_09-o1修回日期:2010—119) (本文编辑:王莉红) 慢病毒经不同途径转染小鼠眼组织的研究 刘双珍蒋晶晶毛俊峰文丹王沙荣军博 随着基因工程技术的不断发展,将外源基因高效转染进入 靶组织治疗一些疑难疾病将成为可能,选用合适的载体导人目 的基因成为基因治疗的关键….本研究使用携带报告基因绿 色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)的慢病毒载体转染 进入活体眼组织,了解活体内不同途径转染后病毒颗粒在眼组 织的分布情况. 1材料与方法 1.1实验动物及主要试剂清洁级15日龄C57BL/6小鼠20 只(上海斯莱克实验动物公司),雌雄不限,体质量20～25g. Polybrene,携带GFP报告基因的慢病毒LV.GFP(上海吉凯公 司),包装系统由带有GFP标记的pGC.LV重组载体,pHelper1.0 及pHelper2