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STAT6-ORF表达载体的构建与鉴定.pdf

中国生化药物杂志2014年第8期总第34卷 论著基础研究 STAT6-ORF表达载体的构建与鉴定 刘锦宙1,杨燕2,谢而付3 (1.江西省宜春市人民医院消化内科,江西宜春336000;2.江西省宜春职业技术学院,江西宜春336000; 3.南京医科大学医学科学部,江苏南京210029) [摘要] 目的本文旨在构建STAT6一ORF表达载体,包装成慢病毒颗粒。方法应用嵌套PCR法从生长状态良好的293Fr细 胞的cDNA中扩增STAT6的完整读码框片段(2544 I和Mlu bp),根据需要在引物的5’端分别引入Cla I酶切位点,将PCR产物克隆 到pMD20T载体上,得到pMD20T—STAT6-ORF克隆;测序验证后,用ClaI和Mh STAT6一ORF片段,通过T4 fluorescence 结果构建带有增强绿色荧光蛋白EGFP(enhanced green 装与鉴定。 [关键词]STAT6-ORF;慢病毒颗粒;增强绿色荧光蛋白 [中图分类号】 R392.12[文献标识码】 A [文章编号】 1005—1678(2014)08—0069—04 EffectofNesfatin-1 onsecretionmechanismof acidand in gastric pepsin rat mucosa gastric LIU Er.fu3 Jin.zhoul,YANGYan2,XIE ofInternal of Vocational (1.DepartmentMedicine,YiehunPeople’SHospitalJiangxi Technical ofMedical Medical College,Yichun,336000,China;3.DepartmentSciences,Nanjing ToobservetheeffectofNesfafin一1onsecretionof acidand inrats its mucosa,and [Abstract]Objective gastric pepsin gastric explorepossible mechanism.Methods18maleSDratsafterintraeerebroventricularcatheterweredivided dose dose andcontral into,highgroup,lowgroup group,each ratWas withNesfatin一10.05 and volumesterilewaterthelateralv

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