分光光度法间接测定白酒中甜蜜素.doc

分光光度法间接测定白酒中甜蜜素 中国卫生检验杂志2006年9月第16卷第9期ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology,Sep2006;Vol16No91073 分光光度法问接测定白酒中甜蜜素 黄会秋 (浙江省平阳县疾病预防控制中心,浙江平阳325400) 【化学测定方法】 [摘要]目的:探讨研究一种适用于白酒样品中的甜蜜素测定方法.方法:用乙醚将甜蜜素从酸化后的样品中提取出 来,挥去乙醚,通过测定其与亚硝酸酯化后生成的硫酸根含量间接测定甜蜜素.结果:线性范围0～0.35g/kg,方法最低 检出限0.02g/kg,加标回收率为86.7%一105%,精密度RSD为8.58%(0.060g/L),3.75%(0.250g/L)与3.66% (0.500g/L).结论:方法成功应用于白酒样品的测定,结果满意. [关键词】分光光度法;白酒;甜蜜素 [中图分类号]0657.3[文献标识码]A[文章编号]1004—8685(2006)o9—1073～02 甜蜜素的化学名为环己基氨基磺酸钠,是目前较为常用 的甜味剂,甜度为蔗糖的30～40倍,其测定多根据与亚硝酸作 用后,生成环己醇亚硝酸酯,然后经气相色谱或高效液相色 谱测定.白酒中由于含有环己醇及环己基等类似物质,与 亚硝酸反应,也能生成环己醇亚硝酸酯,因此传统的色谱法不 适用于白酒中的甜蜜素测定.鉴于此,邵铁锋等人用次氯酸 钠将甜蜜素衍生化后,采用314nm的紫外高效液相色谱法测 定酒中甜蜜素,而秦防等以液质联用法对黄酒中的甜蜜 素测定做了研究,此外离子色谱法也可应用于白酒.本文 采用乙醚将甜蜜素从酸化后样品中提取出来,挥去乙醚,室温 下甜蜜素与亚硝酸酯化后,分光光度法测定由磺酸根转变而 来的硫酸根含量,从而间接测定甜蜜素含量. 1材料与方法 1.1仪器 752紫外光栅分光光度计(上海第三分析仪器厂). 1.2试剂 甜蜜素标准溶液(10mg/m1):自制,经高氯酸标定;亚硝 酸钠(200g/L);铬酸钡悬浊液:称取6.5g铬酸钡,加入 200m1乙酸一盐酸混合液中(5.0mol/L乙酸与0.10mol/L 盐酸等体积混合)制成悬浊液,保存在聚乙烯瓶中;钙一氨溶 液:称取0.4g氯化钙溶于200m16mol/L氨水中,密闭保存; 乙醚,氯化钠,氨水,无水乙醇为分析纯;盐酸为优级纯;水电 导率lt;2.5la,S/cm. 1.3样品测定 称取10.0g白酒样品置25m1比色管中,水浴去除酒精 (大约余2—3m1),加入0.5m1盐酸(1+1)与1g氯化钠,摇 匀后,加入25.0rnl乙醚,振摇1rain,分层后吸取15.0m1乙 醚提取液过无水氯化钙滤入25Inl比色管,用少量乙醚(2m1 左右)洗无水氯化钙,并人比色管,置40~C一45~C水浴挥干, 加水至10m1刻度线,加入1.0ml亚硝酸钠(200g/L)与 1.0ml盐酸(1+2),室温(20~C左右)放置10rain,加入 0.50ml氨水(1+1),混匀,加入2.0ml铬酸钡悬浊液,混匀, [作者简介]黄会秋(1971一),男,主管技师,主要从事理化检验 工作. 3rain后加入2.0ml钙一氨溶液,混匀,加入8.0ml无水乙 醇,加水至刻度,剧烈振摇1rain,过滤,弃去初滤液5—10m1, 收集续滤液10m1左右,于420nm波长,以纯水为参比,用 3cm比色皿,测定吸光度.同时吸取10.0m1水按法做空白 试验. 2结果与讨论 2.1酯化条件 2.1.1酯化时间各吸取0.500g/L甜蜜素标液2.0om1于 8支25m1比色管中,加水至l0m1刻度线,加入1.0m1亚硝 酸钠(200g/L)与1.0m1盐酸(1+2),分别酯化(室温20~C一 22~C)1,3,5,7,10,15,20,30rain,按法检测,观察吸光度的变 化情况,发现5rain后,己酯化完全,慎重起见,本法选择酯化 时间为10rain. 2.1.2亚硝酸钠的量各吸取0.500g/L甜蜜素标液 2.0om1于5支25m1比色管中,加水至10m1刻度线,加入 1.0m1盐酸(1+2),分别加入5个浓度系列的亚硝酸钠溶液 (10,50,100,200,300g/L)1.0m1,按法检测,观察吸光度的变 化情况,发现亚硝酸钠溶液达200g/L后,吸光度已至最高值, 符合要求,遂采用. 2.2酯化液的酸碱控制 铬酸钡与硫酸盐在碱性条件下不易生成硫酸钡沉淀及铬 酸根离子,在酸性条件下,除得到二者外,同时会部分溶解,生 成微量的铬酸(H:cro4)及铬酸氢根离子(HCr04-),二者皆显 黄绿色,如不调至适当的碱性,则会使检测结果偏高.由此可 知,酯化液的酸碱度会对后续的测定有影响.本实验条件下, 酯化液近中性,但为了尽量去