CD4+CD25+T细胞在特发性血小板减少性紫癜中的研究.docVIP

精品论文 参考文献 CD4+CD25+T细胞在特发性血小板减少性紫癜中的研究 张蓝方 郝云良(山东省医学科学院 山东济南 250062；山东济宁市第一人民医院血液科 山东济宁 272000) 【中图分类号】R554.6 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2010)33-0062-02 特发性血小板减少性紫癜(ITP)是一种以血小板破坏加速为特征的慢性获得性器官特异性自身免疫性出血性疾病。ITP的发病机制涉及体液免疫和细胞免疫的异常 , CD4+CD25+ Treg细胞是具有免疫抑制和免疫无能特性的调节性T细胞亚群，既能抑制不恰当的免疫反应,又能限定免疫应答的范围、程度及作用时间，在机体的外周免疫耐受中起着重要的作用。近年来研究发现，CD4+CD25+ Treg 细胞与ITP间存在密切关系，但其作用机制目前尚不清楚 ,本研究通过检测 ITP 患者治疗前后及其中难治性ITP患者外周血Treg细胞的比例 ,探究 Treg 细胞在ITP发病中的可能作用。 1、资料与方法 1.1 研究对象 病例组为26例ITP患者（10例男性，16例女性），平均年龄30.4岁，按照《血液病诊断及疗效标准》[1]确诊。其中初治16例，复治10例。对照组为健康体检者21例（8例男性，13例女性），平均年龄35.7岁。 1.2 CD4+CD25+的检测 所有标本均抽取清晨空腹外周血 2ml,以 EDTAK2 抗凝，初治患者治疗后1月再次取血。取2支流式试管，分别取100mu;l抗凝全血加入每支试管内。轻轻摇匀，依次加入20mu;l Isotype Control(Mouse IgG1/IgG2a)及抗CD4、CD25抗体各10mu;l，室温避光保存20min。取出试管，每管加入1times;溶血素2ml，混匀，室温避光10min，300g离心5min，弃上清液。每管加入PBS液2ml，混匀300g离心5min，弃上清液。加入PBS液0.5ml混匀。4℃避光1小时内上机检测（BD公司的 FACS Caliber型流式细胞仪）。采用Cell quest 软件分析。 1.3 统计学方法 采用 SPSS 10.0统计分析软件处理获得数据,实验结果以均数plusmn;标准差来表示。不同疗效组之间以及和对照组之间的比较应先用单因素方差分析,治疗前后比较用配对t检验。 2、结果 病例组外周血CD4+CD25+T细胞的百分率低于对照组 (Plt;0.05)，见表1。初治ITP患者治疗前CD4+CD25+T细胞比例明显低于正常对照组(Plt;0.05) ,治疗后CD4+CD25+T细胞比例显著升高 ,但仍低于正常对照组(Plt;0.05)，见表2。 表1 病例组与对照组的外周血T细胞表型的百分率（%,x-plusmn;s） 注：与对照组相比，*P＜0.05 表2 初治ITP患者治疗前后和对照组T细胞表型百分率的比较（%,x-plusmn;s ） 注：与对照组相比，* P＜0.05，治疗前后CD4+CD25+/CD4+比值相比，P＞0.05。 3、讨论 ITP发病机制复杂，传统观点认为ITP主要是体液免疫异常导致患者体内的自身抗体与血小板结合，近年的研究发现细胞免疫在ITP发病机制中也起了很重要的作用。更有学者[2]认为尽管 B细胞异常产生针对血小板的自身抗体是 ITP发病的直接原因，T细胞异常导致 B细胞激活可能才是ITP真正的发病机制，部分情况下，T细胞还可能直接导致血小板的破坏。T淋巴细胞的亚群或功能的异常均可能在ITP发病中起重要作用。 CD4+T细胞是免疫系统中重要的免疫调节细胞，据其产生细胞因子的不同可分为TH1型、TH2型、调节性T细胞、Th17细胞。其中调节性T细胞是一类具有独特免疫调节和免疫抑制功能的CD4+CD25+T细胞亚群，在多种自身免疫相关疾病的发病过程中扮演重要角色[3-5]。近年虽有研究表明ITP患者外周血调节T细胞存在异常，但具体机制仍不明确。 本研究发现ITP患者外周血CD4+CD25+T细胞百分率比正常健康人的偏低，治疗后CD4+CD25+T细胞比例会有所升高,说明ITP患者体内确实存在CD4+CD25+Treg细胞数量的异常，可以推测CD4+CD25+Treg细胞数量的减少，导致其免疫抑制功能下降，T细胞增殖不能被有效的控制 ,使自身反应性T细胞激活，加之B细胞活化、增殖产生PAIg，机体的细胞免疫和体液免疫功能紊