001-马钱子药材检验方法确认方案.docVIP

马钱子检验方法确认方案 类 别：检验方法确认 文件编号：VAP-FF-2016-001 起 草 人： 审 核 人： 批 准 人： 一 简介 本品为马钱科植物马钱Strychnos nux-vomica L.的十燥成熟种子。冬季采收成熟果实，取出种子，晒干。苦，温；有大毒。归肝、脾经。通络止痛，散结消肿。用于跌打损伤，骨折肿痛，风湿顽痹，麻木瘫痪，痈疽疮毒，咽喉肿痛。 二 验证目的 马钱子质量标准收载在《中华人民共和国药典》2015版一部, 为保证生产出的产品符合检验标准的要求,确认该检测方法是否适用于本公司生产的产品检验。现对质量标准分析方法进行确认验证，确保检验结果的准确可靠。 三 验证范围 3.1 鉴别 （士的宁、马钱子碱薄层鉴别） 3.2 含量测定 四 验证小组成员及职责 姓 名 职务 责任人 质量部部长 （确认小组组长） 检验仪器确认总负责；组织相关的设备确认培训；批准确认方案；审批确认报告。 QC主管 审核确认方案；督促并监督确认的正常进行；审核确认报告，对整个确认验证项目负责。 QC 按照预定方案进行确认；并做好相关记录；出现异常情况及时汇报和记录；起草确认报告。 五 确认验证实施步骤 5.1 为了确保验证数据的准确可靠，采取以下几个先行保障措施 5.1.1 仪器：己经过校正并在有效期内 5.1.2 人员：均经过培训，熟悉方法及使用的仪器 5.1.3 对照品：购自陕西省药品检验所 5.1.4 材料：均符合检验要求 5.1.5 参考资料 《中华人民共和国药典》2015版一部 《药品GMP指南》（2010年版）《质量控制实验室与物料系统》 5.2 鉴别（2） 5.2.1 试验A：取本品粉末0.5g，加三氯甲烷-乙醇(10：1)混合溶液5ml与浓氨试液0.5ml，密塞，振摇5分钟，放置2小时，滤过，取滤液作为供试品溶液。另取士的宁对照品、马钱子碱对照品，加三氯甲烷制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液。按照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各lOul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮-乙醇-浓氨试液(4：5：0.6：0.4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 5.2.2 试验B：取三氯甲烷-乙醇(10：1)混合溶液5ml与浓氨试液0.5ml，密塞，振摇5分钟，放置2小时，滤过，取滤液作为供试品溶液。另取士的宁对照品、马钱子碱对照品，加三氯甲烷制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液。按照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各lOul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮-乙醇-浓氨试液(4：5：0.6：0.4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点。 5.2.3 确认验证标准:试验A供试品色谱中应检出士的宁、马钱子碱。试验B供试品溶液中不得检出士的宁、马钱子碱。 5.2.4 检测结果及评价 类别 检验结果 试验A 试验B 操作人： 复核人： 日期： 年 月 日 结果及评价： 马钱子原药材中检出士的宁、马钱子碱，而空白溶剂样中未检出士的宁、马钱子碱，本方法可以作为马钱子鉴别中士的宁、马钱子碱鉴别的指导方法使用。 □ 评价人： 评价日期： 年 月 日 5.3 含量测定 照高效液相色谱法测定。 5.3.1 验证方法 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈0.Olmol/L庚烷磺酸钠与0.02moI/L磷酸二氢钾等量混合溶液（用10%磷酸调节pH值2.8）(21：79)为流动相；检测波长为260nm。理论板数按士的宁峰计算应不低于5000。 对照品溶液的制备 取士的宁对照品6mg、马钱子碱对照品5mg，精密称定，分别置1Oml量瓶中，加三氯甲烷逶量使溶解并稀释至刻度，摇匀。分别精密量取2ml，置同一10 ml 量瓶中，