铕元素提高苜蓿老化种子活力的作用机制.PDFVIP

维普资讯 64— 69 12／2003 苴 业 学 招 ACTAPR~／TACULTUI~A,ESINICA 1．2卷第6期 V0l_12，N0．6。 铕元素提高苜蓿老化种子活力的作用机制 王立克 ，洪法水 (1．安徽技术师范学院动物科学系，安徽 风阳 233100；2．苏州大学生命科学院，江苏 苏州 215006) 摘要 ：EuCI。浸种对 自然和人工老化苜蓿种子活力影响的研究结果表 明，EuCI。处理能明显提高苜蓿老化种子的发 芽率、发芽指数 、活力指数 ，增强呼吸作用 。其作用机制为EuCl。能使老化种子超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和过氧 化物酶等保护酶活性增强，能清除体内 ·O。一自由基和降低膜脂过氧化水平 ，修复因老化伤害的种子膜系统。EuCl 处理对 自然老化苜蓿种子活力的提高较人工老化苜蓿种子明显 。 关键词 ：EuCI。；苜蓿 ；老化种子 ；种子活力 中图分类号 ：$551．041 文献标识码 ：A 文章编号 ：1004—5759(2003)06—0064—06 自20世纪70年代 以来，种子老化及劣变受到高度重视 。研究证实播前的各种预处理能显著提高种苗的活力 水平 ，因而提出了老化种子具有可逆性，即 “返老还童”的理论 [1叫]。苜蓿为多年生宿根性草本植物 ，是世界著名优 良牧草之一。在饲料生产上，由于贮存条件不适宜或贮存时间过长，致使苜蓿种子过早退化和衰老，活力下降，影 响了苜蓿等饲料作物的生产。稀土元素可促进各种作物种子的发芽及幼苗的生长[ ，尤其能提高老化水稻种子 的活力[8叫o]。稀土元素铕具有4f电子结构和变价特征 (+2和+3价)，可能在清除体内超氧 自由基等方面有特殊 的作用，而种子的老化与体 内自由基的过多积累有关，因此研究铕元素与老化种子活力的关系具有理论和生产意 义。本文报道三氯化铕 (EuC1。)对 自然和人工老化苜蓿种子活力的影响及有关作用机制。 1 材料与方法 1．1 材料处理和培养 试验材料为紫花苜蓿 (Medicagosativa)品种的自然老化种子 (1997年陈种子)和人工老化种子。种子在人工 老化前发芽率为83 。人工加速老化种子的方法 ：将种子单层均匀地铺在人工智能气候箱的金属网上，种子上面 15cm处用滤纸遮盖，以吸收箱顶滴下的水珠，于 (45±1)℃，100 相对湿度下处理 7d。老化种子用0．1 HgC1。 消毒 15min，蒸馏水和去离子水冲洗数次 ，再分别用0(对照，去离子水)，10，20，30，40，50，60和70mg／L的EuC13 溶液浸泡48h(每24h更换 1次溶液)，每个处理种子为 1g，浸泡液为10ml。处理后做理化指标测定。 1．2 理化 指标测定 挑选大小一致、饱满的种子 100粒播入垫有2层湿纱布的培养皿中(由10cm)，并将培养皿置入25~C人工智能 气候箱中做萌发试验 。每个处理重复6次。在苜蓿种子发芽期间逐 日统计发芽率。7d后将幼苗烘干称重。按陶 嘉龄等 的方法计算发芽指数和活力指数。发芽指数一 G ／D(G是t时间内的发芽数， 是相应的天数)。活力 指数一发芽指数 ×幼苗干重。 取种子 50粒 ，用去离子水冲洗8次，吸干表面水分 ，置于10ml去离子水中，于25℃下浸泡 12h(每4h摇动 1 次)后，按电导仪 (DDS--11型电导率仪)法[11]测定种子膜相对透性。 萌发试验进行到24h后，用小篮子法取萌发种子 u]，测定呼吸速率。萌发试验进行到84h后 ，取幼苗提取和 测定超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化氢酶 (CAT)、过氧化物酶 (POD)活性，·Oz一产生速率，丙二醛 (MDA)含量。 SOD的提取和测定采用Giannopolitis等的方法 他]；CAT的提取和测定采用Wakamatsu等的方法Ⅱ。；POD的提 取和测定采用愈创木酚法 ]；MDA的提取和测定采用硫代巴比妥酸反应法n ；蛋白质含量测定按Bradford的方