铜绿假单胞菌生物被膜形成能力及其基因型的相关性分析.pdfVIP

图6 序列非依赖性扩增全eDNA示意图 PCR引物含有Oligo(dT)24和一个13碱基序列’(以X代表) Fi96Sketch the oftotalcDNA showingsequence·independentamplification ’PCR contained one36nucleotide primers Oligo(dT)and sequence(X) 本研究通过各个环节的优化，建立了稳定可靠的单细胞RT-PCR实验体系，该法灵敏度极高，对于单 个细胞中的特定靶基因和全部mRNA均能进行有效的扩增，扩增成功率可达75-90％，对于目的基因的 扩增具有很好的特异性与忠实性，对单细胞全部mRNA的扩增产量亦可达烬水平，足够其他常规研究所 用。本方法为解决分化系统的异质性和基因表达模式分析需要大量充分纯化的细胞之间的矛盾提供了一 条途径。从不同细胞中扩增的cDNA可迸一步用于构建消减文库，或在构建cDN