添加大孔吸附树脂对朱红密孔菌转化生产香草醛的影响研究.pdfVIP

发酵工程学科的进展 ——第四次全国发酵工程学术讨论会论文集 添加大孔吸附树脂对朱红密孔菌转化生产香草醛的影响 郑 璞， 孙志浩， 王明君， 郑丽蓉， 李振伟 (江南大学生物工程学院。无锡，214036) 摘要：通过对11种大孔吸附树脂的比较，选出能有效提高朱红密孔菌转对番草酸转化的 HZ802树脂．对其添加条件试验表明，当朱红密孔菌对29／L香草酸转化12h时，加入 HZ802树脂继续转化。香草醛浓度可提高到1．299／L，转化率达71％；当香草酸浓度为49／L 时，香草醛浓度最高达2．509／L。试验说明：添加合适的吸附树脂进行耦合转化，能有效提 高朱红密孔菌转对底物的转化率和番草醛的产量． 香草醛，即香兰素(Vanillin)，化合物名称为4一羟基一3一甲氧基苯甲醛，是全球产量最大的合成香 料．作为一种广谱型高档香料，香草醛广泛应用于食品、烟草及医药工业．随着人们对天然品需求愿望 的增强，利用微生物生产天然香兰素的研究倍受关注【¨．本研究室经筛选得到朱红密孔菌(Pycnporus cinnabarnus)CGMCCNo．034和纺锤芽孢杆菌(Bacillus 和异丁香酚生成香草醛[2d]．在这两种微生物对底物的转化过程中，都存在产物抑制的现象，通过加入 合适的吸附树脂可减弱这种抑制‘“．本文报道添加大孔吸附树脂对提高朱红密孔菌转化生成香草醛的 影响． 1 材料与方法 1．1材料 1．1．1微生物菌种： CGMCC 朱红密孔菌P．cinnabarinusNo．034；本研究室保藏。 1．1．2材料： 培养基：见文献[2]。 Z 香草酸，AKA·9、D900、D2040、DA201、201 HPD300、HPD600、x一5树脂，市售。 1．2方法 1．2．1朱红密孔菌培养与转化方法： 床上进行转化。 1．1．2香草醛、香草酸测定方法： 分别用HPLC测定洗脱液和滤液中的香草醛和香草酸浓度‘51。 1．2．3树脂对香草醛质量吸附量与树脂回用率计算： 596 第四次全国发酵工程学术讨论会 溶液体积(m1)；W为树脂湿重量(g)。 回用率％一本次树脂重量÷上次树脂重量×100％ 2结果与讨论 2．1 吸附树脂对朱红密孔菌转化香草酸生成香草醛的影响 香草醛是朱红密孔菌代谢香草酸的中间代谢产物[6]，在发酵转化液中香草醛浓度超 过0．69／L时，菌体生成香草醛的能力明显下降，并且随着转化时间的延长，香草醛会进 一步降解。产物的存在，一方面有产生明显的产物抑制作用，另一方面还会诱发香草醛 继续的代谢。因此，朱红密孔菌转化终浓度29／L香草酸的同时，分别加入AKA-9、 考察其对生成香草醛的影响。从图1可知8种大孔吸附树脂有利于朱红密孔菌对香草 酸转化，其中HZ802、HPD300树脂较好。选择HZ802进一步研究。 1 一 O．8 竺0．6 嚣0．4 收0．2 0r-．_．一。．_．_．-．_。_．_．_．_， 芦≯梦零对≯怠∥矿≯◇ 树脂 图1不同树脂对朱红密孔菌转化香草酸生成香草醛的影响 2．2 HZ802树脂加量对朱红密孔菌转化香 草醛产生的影响 在100ml朱红密孔菌转化29／L香草酸 的转化液中，分别加入49、69、89、109、129 HZ802树脂，转化48h后测定树脂和转化液 中香草醛含量(图2)。加入树脂后香草醛的 总浓度从0．659／L提高0．989／L。虽然树脂 加量对香草醛的总浓度影响从不大，但是吸附 到树脂上的香草醛浓度是随树脂量的增加而 增大，当树脂量增加到109以后，转化生成的图2HZS02加量对朱红密孔菌转化香草酸生 香草醛几乎都被树脂吸附。 成香