蛋白质组学技术在病毒及其感染机制研究中的应用.pdfVIP

中国畜牧兽医 2013年第40卷第5期 生物技术 ·75· 蛋白质组学技术在病毒及其感染机制研究中的应用 孙成友1，李娟2，刘雨田1，李玉保3，迟田英1，宋芳1，于小静1。王志亮1 (1．中国动物卫生与流行病学中心国家疯牛病参考实验室，山东青岛266032； 2．山东农业大学动物医学院，山东泰安 271018；3．聊城大学农学院，山东聊城252029) 摘要：在病毒学领域中，如双向差异凝胶电泳、偶联应用质谱和稳定同位素标记等的蛋白质组学技术正在被广泛应用，可 从整体层面上分析组织或细胞内动态变化的蛋白质组成、表达水平与翻译后修饰，探索蛋白质的功能及蛋白质之间相互作用 与联系，有助于病毒感染及病毒与宿主间的相互作用机制的研究，推动病毒相关疾病诊断和治疗的发展。作者简要论述了近 年来蛋白质组学技术在病毒及其感染机制研究中的应用，并对其在病毒学研究中的应用前景作了展望。 关键词：蛋白质组学；病毒；感染机制；应用 中图分类号：Q816 文献标识码：A 文章编号：167卜7236(2013)05—0075—04 蛋白质组学是生命科学研究领域中的一门新兴 再经转录后的修饰会产生更多种的产物，其中的这 学科，可以高通量的分析正常及病理条件下机体、组 织、细胞或亚细胞成分中的全部蛋白质，对不同空 为研究对象的，在蛋白质组学中对蛋白表达分析方 间、不同时间上动态变化的蛋白质组的整体进行比 面的研究应用较多的技术是双向凝胶电泳(two—di— 较，分析不同蛋白质组之间在表达数量、表达水平和 mensional 修饰状态上的差异。蛋白质组学可以发现与疾病相 2010)、基于2一DE而将其重复性和精确性加以改进 关的特异蛋白质，对病变相关蛋白的研究可以为探 difference 的双向差异凝胶电泳(two—dimensional 索病毒本身及其感染机制提供信息，且这些蛋白还 可能作为疾病诊断潜在的生物标志和治疗的药物 筛选到的差异表达蛋白进行快速精确鉴定的偶联应 靶点。 用质谱(mass 1蛋白质组学研究常用技术 蛋白质组(proteome)这一概念由Wilkins和 核心技术。在质谱技术中的基质辅助激光解吸电离 Williams等在1994年首次提出，以它作为研究对 laser 飞行时问质谱(matrix—assisted desorption 象的蛋白质组学是后基因组时代产生和发展的一门 ionization mass time—of—flight 新兴学科，2001年被Science杂志列为六大研究热 TOF—MS)是分析多肽和蛋白质混合物的主要方法， 点之一(Kong等，2010)，它从整体层面上分析组 另外使用标记的氨基酸在细胞中进行稳定同位素标 织，细胞内动态变化的蛋白质组成、表达水平与翻译 记(stabte—isotopelabelingbyaminoacidsincell 后修饰，探索蛋白质的功能及蛋白质之间相互作用 与联系。人类约3万个基因通过不同的外显子剪接 定量病毒感染后细胞蛋白中表达差异的有效方法。 方式可以形成约10j种不同的蛋白质，这些蛋白质 SILAC标记的氨基酸整合到细胞蛋白中然后进行