在含血清代用品的无血清培养条件下分离、纯化、培养人表皮干细胞研究.pdfVIP

在含血清代用品的无血清培养 条件下分离、纯化、培养人表皮干细胞 李剑戴育成 摘要： 目的：建立一种无血清分离、纯化、培养人表皮干细胞的方法．方法：从幼儿包皮中 分离、用胶原IV纯化、分别在有血清和无血清培养条件下培养人表皮干细胞。分别进行形态学观 察及克隆计数、传代计数，流式细胞术进行仅s、CD，。表达情况及细胞周期分析，免疫组化法鉴定 有血清培养组形态学观察及克隆数、传代数，QchlCD，。们。细胞百分率及处于GO-G1期细胞百分率， 与无血清条件组2比较有统计意义． 关键词：无血清培养、表皮干细胞 目前表皮干细胞培养均在培养体系中加入一定比例的血清。但血清中的成分十分复杂，至今 尚未完全弄清楚。譬如已报道在血清中含有500多种蛋白质，它们的功能还不完全清楚。且血清 中既含有刺激物质也有抑制物质，有的物质甚至有毒性作用[I-3]o此外，各批血清之间所含激素和 生长因子的变化甚大。表皮干细胞的培养主要是尽量维持干细胞处在少分化状态，所以国外也有 学者主张采用低血清培养。无血清中的血清替代物来自血清中少数有效成分，虽然对某些种类细 胞的生长刺激不如有血清，但可能对干细胞培养比较适合。因干细胞是慢周期细胞，如刺激条件 太高，将很快刺激它