ITP患者外周血自身抗体的检测及意义.docVIP

精品论文 参考文献 ITP患者外周血自身抗体的检测及意义 梁玲琪1 朱灵芝2 （1台州市肿瘤医院检验科 浙江 台州 317502) (2台州市第一人民医院检验科 浙江 台州 318020） 【摘要】 目的：探讨特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者血小板相关抗体水平的意义。方法：用流式细胞仪检测58例ITP患者和62例正常对照组外周血血小板特异性自身抗体（PAIgG、PAIgM）。结果：ITP 组患者PAIgG数值明显高于正常对照组（Plt;0.05)，而PAIgM与正常对照组无显著差异（Pgt;0.05）。结论：血小板相关抗体PAIg是ITP患者诊断、治疗反应的有用指标。 【关键词】 紫癜；相关抗体；PAIg ；血小板 ；ITP 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）34-0123-02 特发性血小板减少性紫癜(ITP)是一种常见的多发于儿童，青壮年和妇女的出血性疾病，是一类较为常见的出血性疾病。本病特点以外周血PLT减少及其生存时间缩短，80%-95%病人的血清中有血小板表面IgG抗体，本病的病因不是十分明了。本研究采用流式细胞仪测定58例ITP患者和62例正常对照组患者的血小板相关抗体，并对其诊断价值进行探讨。 1.对象和方法 1.1对象 2011年3月～2014年3月我院初诊为ITP的住院患者或门诊患者58例，其中男30例，女28例，年龄3—83岁，中位年龄34岁，诊断符合1998年（血液学诊断及疗效标准）（1）。对照组62例，男35例，女27例，年龄10—79岁，中位年龄35.4岁，均无血小板数量及其它异常的疾病。 1.2 仪器和试剂 1.2.1 仪器：美国Beckmancoulter EPICS-XL流式细胞仪。 1.2.2 试剂：鼠抗人IgM单抗用灭菌蒸馏水溶解后分装，每支为2ul,置-20℃保存，使用前用PBC1:10稀释；鼠抗人IgG单抗溶解方法同上;鼠抗人Igg1-FITC为对照；冷冻牛血清；TEN缓冲液（Trise,EDTA-K2,Nacl)。 1.3 方法 PAIgM、PAIgG测定用全血2～3ml,使用EDTA-K2抗凝管抗凝，颠倒混匀。PAIgM、PAIgG用直接免疫荧光学检测。待测标本125g/分离心10分钟，制备成富含血小板血浆(PRP)，继续将该血浆0.6ml加TEN洗涤（650g/分离心10分钟)二次,弃去上清液，再加TEN0.6ml。测定管和对照管分别加5ul血小板悬液及10ul小牛血清，置于暗处15min。测定管中分别加入5ul异硫氰酸荧光素（FITC)鼠抗人IgM与IgG稀释液，对照管加5ul鼠抗人IgG-FITC,置于室温暗处30min，使用TEN缓冲液清洗一次（3000转/分离心5min),弃上清液，以TEN0.6ml混悬液用流式细胞仪检查结果，上机器检查前使用荧光微球校验激光光路，使用前向散射光和侧向散射光,设门在PLT群，检测104以上阳性血小板百分率和血小板的平均荧光强度。阴性对照结果为1.0，检测时间小于2h。 1.4数据处理 结果用统计学处理，组间分析应用t检验，Plt;0.05有统计学意义。 2.结果 58例ITP患者与62例正常对照组的PAIg(PAIgM、PAIgG)测定结果见表1。ITP患者的PAIgG数值远远高于正常对照组，经统计Plt;0.05，差异有统计学意义；ITP患者的PAIgM数值和正常对照组数值比较无显著性差异，经统计Pgt;0.05。PAIgG升高较PAIgM明显。 3.讨论 特发性血小板减少性紫癜（ITP)的病因不是很明了，目前认为与某些病毒感染有关，其临床特点以出血为特征，可表现为皮肤、粘膜或内脏出血，这种出血与血小板数量减少有密切相关[1]， 骨髓巨核细胞成熟障碍，血小板生存时间缩短及抗血小板自身抗体出现，它可能是免疫介导的血小板破坏增多引起。ITP是临床上最常见的出血性疾病，约占出血性疾病总数的30%，临床上尚无特异的诊断方法，PAIgG的检测仍不失为有效的临床诊断的参照指标，有着相当重要的临床意义。由于患者体内产生血小板相关抗体，80%-90%病例的血清或血小板表面有IgG抗体，从而使血小板破坏增加，大多数为IgG[2]，故检测血小板表面相关抗体PAIgG有助于对该病的诊断。目前ITP的诊断主要依靠临床表现、骨髓检查等，尚无特异实验室