Nestin（巢蛋白）在急性出血坏死性胰腺炎中的作用.docVIP

精品论文 参考文献 Nestin（巢蛋白）在急性出血坏死性胰腺炎中的作用 王延红 (大连第五人民医院 116021） 　　【摘要】目的 探求胰腺细胞内nestin阳性细胞数对胰腺炎的预后有积极意义。方法 通过对SD大鼠支撑胰腺炎模型后，不同的处理手段，采点处死后，观察指标：(1)光镜下胰腺组织病理学评分：对胰腺标本根据水肿炎症细胞浸润、出血、坏死和腺泡细胞空泡化形成进行病理组织学评分；(2)Nestin阳性细胞数量 (3) 血清淀粉酶结果 胰腺细胞（24h）nestine(阳性数)在24h有变化。与SOG组比较：﹡＜0.05；与APG相比△＜0.05结论应用干预的手段增加胰腺细胞内nestin阳性细胞数对胰腺炎的预后有积极意义。 　　【关键词】 Nestin（巢蛋白） 急性出血坏死性胰腺炎 　　【中图分类号】R657.5+1 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2014）02-0107-02 　　急性出血坏死性胰腺炎（AHNP）起病急骤，治疗难度大，并发症多，病死率高。巢蛋白（nestin）是中间丝蛋白，在胚胎发育早期，在神经上皮干细胞和发育中的骨骼肌中强表达挥着重要作用，在大鼠胰腺发育的胚胎后期、新生期、成年三阶段，nestin阳性细胞数呈下降趋势。正常成人胰腺组织中存在着少量巢蛋白阳性细胞。本实验主要观察nestin的表达在急性出血坏死性胰腺炎中的作用 　　材料与方法 　　1.材料：SD大鼠由大连医科大学动物饲养场提供。L-NAME、L-arg由Sigma公司购买。nestin免疫组织化学染色。普通光学显微镜，日本Olympus。全自动生化分析仪：芬兰KONE公司产。 　　2.方法：（1）急性出血坏死性胰腺炎模型准备：大鼠禁食水12h，用2%戊巴妥钠（40mg/kg）肌注麻醉。模型参照Aho等方法无菌操作，正中切口，剖开腹腔，在胆管和胰管入十二指肠处做临时性结扎，穿刺胰管，向胆管内加压注入1.5%去氧胆酸钠（0.05mg/100g），注射10min后，去除结扎线，关闭腹腔，将大鼠放入笼中饲养，自由进水。（2）假手术组制备：术前准备同上，剖开腹腔后，轻轻翻动胰腺，随即关腹。分组设计：所有动物共120只，雌雄各半，随即分为四组，第一组为假手术组（SOG）；第二组为急性出血坏死性胰腺炎组（APG）；第三组为制备AHNP后立即舌下静脉注射L-NAME（2.5%，25mg/kg）组，即L-NAME组；第四组为制成AHNP后，立即舌下静脉注射L-arg（400mg/kg）组，即L-arg组。形态学观察：在术后6h、12h、24h采点处死后，取动物胰腺用10%福尔马林液固定标本。石蜡包埋切片，分别进行病理评分，nestin免疫组织化学实验。观察指标：（1）光镜下胰腺组织病理学评分：对胰腺标本根据水肿炎症细胞浸润、出血、坏死和腺泡细胞空泡化形成进行病理组织学评分；（2）Nestin阳性细胞数量 ( 3) 血清淀粉酶 　　3.数据处理：血清淀粉酶采用方差分析及q检验，P＜0.05为差异有统计学意义。Nestin阳性细胞数量,进行方差分析及q检验。 　　结果 　　表1 各组血清淀粉酶值（x-plusmn;s） 　　 　　注：与SOG组比较：﹡＜0.05；与APG相比△＜0.05 　　结论 　　巢蛋白（nestin）是中间丝蛋白，在胚胎发育早期，在神经上皮干细胞和发育中的骨骼肌中强表达挥着重要作用，在大鼠胰腺发育的胚胎后期、新生期、成年三阶段，nestin阳性细胞数呈下降趋势。正常成人胰腺组织中存在着少量巢蛋白阳性细胞。本实验主要观察nestin的表达在急性出血坏死性胰腺炎中的作用 　　本实验采用不同的处理后，分别观察SD大鼠的血清淀粉酶、胰腺病理评分，及胰腺细胞（24h）nestine(阳性数)等指标。认为（1）胰淀粉酶：胰腺炎时呈上升趋势，均比SOG相应时高。应用一氧化氮合酶抑制剂L-NAME后，血清淀粉酶更高；相反L-arg应用后，呈下降趋势。（2）胰腺病理评分；APG在24h后比12h变化明显（＜0.05），应用L-arg则相反。（3）胰腺细胞（24h）nestine(阳性数)在24h有化。与SOG组比较：﹡ ＜0.05；与APG相比△＜0.05。 　　综上所述，我们研究证明，应用干预的手段增加胰腺细胞内nestin阳性细胞数对胰腺炎的预后有积极意义。具体机理不明，有待进一步研究。可能是通过对损伤胰腺细胞膜结构稳定性及细胞器功能恢复有关。 　　参考文献 　　[1]Flavahan NA,van Houtle PM. Mechanisms underlying the inhibitory inter