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乳糜血液对ELISA检测结果的影响分析
精品论文 参考文献
乳糜血液对ELISA检测结果的影响分析
新疆生产建设兵团第七师医院
【摘 要】目的:研究分析乳糜血液对ELISA检测结果的影响。方法;将不同浓度的HBsAg质控血清加入到不同程度的入迷血浆中,比较其灵敏度和不精密度。结果;不同程度的乳糜血液不精密度批内平均CV 6.1%,批间平均CV 23.7%,轻度乳糜血液CV15.8%,中度乳糜血液CV25.6%,重度乳糜血液CV40.1%。HBsAg含量为1.5 ng/mI的重度乳糜血液,平均漏检率6.33%;HBsAg含量为1.0 ng/mI的中度乳糜血液,平均漏检率12.33%;HBsAg含量为05 ng/mI的轻度乳糜血液,平均漏检率30%;结论;同程度的乳糜血液放置时间越长,oD值下降就越明显,其灵敏度越低,便会出现漏检,因此,使用ELISA检测时,轻度乳糜血液的放置时间不能超过3天。中度乳糜血液的放置时间不能超过1天。重度乳糜血液需即时进行检测。
【关键词】乳糜血液;ELISA;HBsAg
【中图分类号】Q461【文献标识码】A【文章编号】2096-0867(2016)-09-021-02
由于人们进行无偿献血绝大多数均是在餐后进行,所以会造成不同程度的乳糜血液出现,进而影响血液检测的结果[1]。当前采血供血机构绝大多数均采用酶标仪比浊法和乳糜程度目测法等进行脂血的筛选,本次研究,对乳糜血液进行ELISA检测,探讨其检测结果,现总结如下。
1检测方法与材料
1,1仪器与试剂盒
仪器全自动酶免仪为瑞士 TeCan Freedom EVolyzer_150-8,酶标仪由深圳雷杜有限公司提供,采用Heidolph INKUBATOR1000恒温震荡仪;HBsAg诊断试剂盒:(供应商:上海科华生物技术有限)。
1.2检测方法
1.2.1标本:将肉眼能看到的有乳糜微粒的血浆,给予不同程度的稀释后,进行清晰度比较(使用淡黄色透明血浆标准管进行比对),采用与标准管清晰度一样的稀释倍数作为次血浆的乳糜指数标准。轻度乳糜血液为,乳糜指数小于等于2;中度乳糜血液为,乳糜指数在3~5之间;重度乳糜血液为,乳糜指数大于5;取2份不同程度的乳糜血液进行检测。
1.2.2测定不精密度:向重度乳糜血液、中度乳糜血液、轻度乳糜血液和正常血液中加入一定浓度的HBsAg阳性血清,按照即时、4℃静置1~7天,连续测定5天,每天1次,每次20孔,详细记录OD值。
1.2.3检测灵敏度:向重度乳糜血液、中度乳糜血液、轻度乳糜血液和正常血液中加入指控血清,让含量在1.5 ng/mI、1.0 ng/mI、0.5ng/Mi,按照即时、4℃静置1~7天,连续测定5天,每天1次,每次20孔,计算?xplusmn;s CV和灵敏度
1.3统计学处理采用采用配对资料t进行检验。
2结果
不同程度的乳糜血液和不同的放置时间不精密度结果比较详见表1;HBsAg阳性乳糜血液和放置时间的灵敏度检测结果详见表2。
3讨论
乳糜血液是指人们从食物中摄取的脂肪,经过吸收后进入血液系统,进而形成乳糜微粒再于血浆混合后便形成乳糜血液[2]。比重小和体积大是乳糜微粒固有的特点,当放置一定的时间后便会出现一层厚薄不等的乳糜,在检测过程中仪器是从上到下按照液体的高度进行加样,由于乳糜层过高,则加入的乳糜血液量需要更多,而加入的量则减少,同时乳糜微粒的体积大小对加压有直接影响,微粒越大加样液就明显减少,严重影响检测结果,导致误差加大,继而CV偏大[3]。表1的结果就证实了这一点,与正常血液进行比较,不同程度的乳糜血液和放置时间的不精密度,差异显著,有统计学意义(p<0.05)。即乳糜血液程度越高、越严重,同时放置时间越长,oD值下降就越明显[4]。
表1的结果证实,HBsAg阳性血清的正常和乳糜血液防止时间越长,结果显示其灵敏度越低,同时出现漏检的情况[5],HBsAg含量为1.5 ng/mI的重度乳糜血液在第3天出现漏检,到第7天时漏检率高达50%(10/20),平均漏检率6.33%(19/300)。HBsAg含量为1.0 ng/mI的中度乳糜血液在第7天出现漏检,重度乳糜血液在第3天出现漏检,第7天时漏检率高达65%(13/20),平均漏检率12.33%(37/300)。HBsAg含量为05 ng/mI的轻度乳糜血液在第3天出现漏检,中度乳糜血液在第3天出现漏检,第7天时漏检率高达30%(6/20),平均漏检率34.00%(102/300)。因此,使用ELISA检测时,轻度乳糜血
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