实验 黄曲霉毒素测定.pptVIP

实验二十、食品中黄曲霉毒素B1的检测;一、实验目的与要求： 1、学习酶联免疫(ELISA)方法测定粮食及食品中黄曲霉毒素B1的实验原理，掌握实验的操作要点及测定方法 2、了解酶联免疫(ELISA)的工作原理，正确熟练使用酶标仪。 二、实验原理： 本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，样品中的黄曲霉毒素B1经提取、脱脂、浓缩后与定量特异性抗体反应，多余的游离抗体则与酶标板内的包被抗原结合，加入酶标记物和底物后显色，与标准曲线比较测定含量。 ;三、仪器与试剂;四、实验步骤 ;2. 玉米（脂肪含量3.0～5.0％）： 样品粉碎后过20目筛，称取20.0g，加入250mL具塞锥形瓶中。准确加入50.0mL甲醇一水（80+20）溶液和15.0mL石油醚，盖塞后滴水封严，150rpm振荡30min。用快速定性滤纸过滤于125mL分液漏斗中,待分层后，放出下层甲醇水溶液于50mL烧杯内，从中取10.0mL （相当于4.0g样品）于75mL蒸发皿中,以下按上述“65℃水浴通风挥干”起，依法操作。 3．花生（脂肪含量15.0－45.0％）： 样品去壳去皮粉碎后称取20.0g，加入250mL具塞三角瓶中，准确加人100.0mL甲醇水(55 ＋45）溶液和30mL石油醚,盖塞后滴水封严，150rpm振荡30min，静置15min后用快速定性滤纸过滤于125mL分液漏斗中，待分层后，放出下层甲醇水溶液于10