六血钙测定(范玉平).pptVIP

* 实验六 血 钙 测 定 实验目的 1 掌握甲基麝香草酚蓝比色法测定血清钙的原理。 2 熟悉总钙和离子钙的关系。 血钙概述 钙是体内含量最多的无机盐，占体重的1.5%～2%，总量约700～1400g。 99%以上的钙沉积于骨骼、牙齿。骨骼是钙的最大储备库。 血钙概述 细胞内钙 1 浓度低 2 90%以上的细胞内钙存在于细胞器（线粒体﹑肌质网﹑内质网）中，其余存在于细胞质中 3 细胞的多种功能都依赖于细胞内外极高的Ca2+浓度差。 血钙概述 细胞外钙 指存在于血浆或血清等细胞外的钙， 参考范围： 成人：2.10~2.55mmol/L 儿童: 2.25~2.67mmol/L 血钙概述 血钙 游离钙（50%） 结合钙 蛋白结合钙（40%） 可扩散结合钙（10%） 可扩散钙 非扩散钙 血钙概述 1 以上三种钙处于不断交换的动态平衡中。 2 当pH↓→ALB的氨基酸链带正电荷↑→结合钙↓,游离钙↑。 3 ALB↓→结合钙部分↓,总钙↓,但游离钙可正常。 钙的吸收 正常成人每天摄入 0.6—1.0g 主要吸收部位：小肠上段，以十二指肠上部 吸收能力最强 影响吸收因素：活性维生素D，机体需要。 钙的排泄 80%经肠道，20%经肾脏。 钙的生理功能 1.参与血液凝固过程，是凝血因子之一。 2.增强心肌收缩，降低神经肌肉兴奋性。 3.降低毛细血管的通透性,减少渗出。 4.是许多酶（脂肪酶，ATP酶等）的激活剂，也是其它一些酶（维生素D3-1α-羟化酶）的抑制剂。 5.作为激素的“第二信使”。 测定方法 项 目 方 法 总钙测定 染料结合法、滴定法、荧光法、原子吸收分光光度法、酶法、同位素稀释质谱法 等。 离子钙测定 离子选择电极法 测定方法 国际临床化学联合会（IFCC）推荐： 决定性方法：同位素稀释－质谱法（ID-MS） 。 参考方法：原子吸收分光度法（AAS）。 常规方法：邻甲酚酞络合酮（O-CPC）法。 测定方法 注：在评价钙的生物学活性方面，以测定离子钙为佳，但从反映机体钙的总体代谢状况，总钙测定更为客观，两者不能完全相互替代。 实验原理（MTB比色法） 血清中钙离子在碱性溶液中与甲基麝香草酚蓝(MTB)结合，生成蓝色的络合物。加入适当的8-羟基喹啉，可消除镁离子对测定的干扰，与同样处理的钙标准液进行比较，以求得血清总钙的含量。 甲基麝香草酚蓝线性范围：0-3.75 mmol/L （超过时，用生理盐水5或10倍稀释后再测定，结果乘以稀释倍数。） 单位换算：1mmol/L血清钙=4.0mg/dL 试剂 试剂1（显色剂） 甲基麝香草酚蓝 0.12 mmol/L 聚乙烯吡咯烷酮 0.10 mmol/L 8-羟基喹啉 13.8 mmol/L 浓硫酸 25.5 mmol/L 试剂2(缓冲液) 二乙胺 0.72 mmol/L *