平顶山地区儿童呼吸道病毒的流行病学及病原学调查.docVIP

精品论文 参考文献 平顶山地区儿童呼吸道病毒的流行病学及病原学调查 河南省平顶山市中医医院 467000 摘要：目的 探讨和了解平顶山地区儿童呼吸道病毒感染的流行趋势及病原，达到早期诊断，指导治疗的目的。方法 采用直接免疫荧光法，利用抗病毒特异性单克隆抗体快速检测3023名儿童呼吸道分泌物中的呼吸道合胞病毒（RSV），流感病毒A型（IFVA），流感病毒B型（IFVB），副流感病毒1（PIV1），副流感病毒2（PIV2），副流感病毒3（PIV3），和腺病毒（ADV）等7种呼吸道常见病毒，并进行统计学分析。结果 在3023例呼吸道感染患儿中，检出病毒感染1026例，检出率为33.94%，其中RSV最多，为500例，占阳性率的48.7%，流感病毒A型为179例，占阳性率的17.45%，副流感病毒3（PIV3）共184例，占阳性率的17.90%，腺病毒（ADV）108例，占阳性率的10.50%，流感病毒B型（FIVB）51例，占阳性率的5.00%。结果进一步显示RSV是最常见的的病毒，其次为流感病毒A型、副流感病毒3，腺病毒和流感病毒B型，副流感病毒2，副流感病毒1。RSV高发季节为2013年9月—2014年1月，流感病毒A型为2013年7月—2013年9月，其他呼吸道病毒无明显季节性。结论 直接免疫法（DFA）能够提供快而可靠的方法用于呼吸道常见病毒的诊断。 关键词：直接免疫荧光法；呼吸道病毒；鼻咽分泌物；医院感染 儿童最常见的感染性疾病之一——急性呼吸道感染，是造成婴幼儿死亡的重要原因，对健康保健系统造成了巨大的经济负担[1，2]。研究资料显示，儿童期急性呼吸道感染大部分是由细菌以外的病原体引起的，尤以病毒最普遍[3]。其中，甲型流感病毒（IFA）、乙型流感病毒（IFB）、呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）及副流感病毒1、2、3型（PIV1、PIV2、PIV3）等是最常见的病毒性病原体[4，5]。呼吸道病毒的流行因国家、地区、医院、年份、季节和年龄等存在差异，而病原学快速诊断对临床治疗具有指导意义[6]。因此，为了解平顶山地区儿童呼吸道病毒的感染状况，为预防和治疗提供科学依据，指导临床医生合理使用抗生素，提高呼吸道感染治愈率，我院于2013年11月——2014年11月对3023名急性呼吸道感染患儿的鼻咽分泌物应用直接免疫荧光技术进行7种呼吸道病毒的检测，现将结果报告如下。 1资料与方法 1.1一般资料 2013年11月——2014年11月收治急性呼吸道感染患儿3023例，年龄分成4组，其中0-6月586例；6月-1岁979例；1-3岁573例；＞3岁885例。诊断标准参照《实用儿科学》。 1.2方法 1.2.1标本的采集处理 采用一次性无菌鼻咽拭子从患儿的鼻孔进入7-8 cm到达鼻咽部，采集鼻咽部细胞，加入适量生理盐水置收集管中及时送实验室进行直接免疫荧光检测。 1.2.2直接免疫荧光法检测7项呼吸道病毒 将采集到的标本打匀，800g离心5 min后去除上清保留沉淀，用PBS洗涤沉淀，去除黏液等杂质。最后将沉淀溶解在0.3-0.5 ml的PBS溶液中，吹打成悬液，在玻片的7个孔中加样（25 mu;l/孔），干燥后，预冷丙酮固定10 min，再滴加FITC标记过的7种呼吸道病毒单克隆抗体（D3 Ultra DFA，Diagnostic Hybrids），37℃孵育20 min，再用洗涤液洗涤，最后封片，荧光显微镜观察。 1.2.3阳性结果判断 病毒抗原与其对应的抗体结合后，形成抗原抗体复合物，荧光显微镜下，呼吸道病毒抗原阳性细胞呈苹果绿荧光，阴性细胞无荧光，被伊文思蓝染成红色背景（见图1）。在200倍视野下，＞2个阳性细胞，该标本即判为阳性。 1.2.4统计学方法 应用SPSS16.0软件进行统计分析。计数资料采用c2检验，计量资料采用t检验，P＜0.05认为差异有统计学意义。 图1.呼吸道合胞病毒荧光显微镜下图像 2.结果 2.1病毒检出结果 送检标本共3023份，阳性者1026份，总阳性率33.94%，其中以呼吸道合胞病毒感染最多，见表1。 2.2不同年龄组儿童呼吸道病毒的感染情况 不同年龄呼吸道病毒感染率不同，0-6月龄的占39.42%（231/586），6月-1岁的占33.50%（328/979），3岁以上的占23.84%（211/885），发病高峰在1-3岁组，达44.68%（256/573）。经c2检验，除0-6月组与1-3岁组感染率无显著性差异（P＞0.05），其余各组间均呈显著性差异（P＜0.05）（见表2）。 3.讨论 急性呼吸道感