HCV基因型与IFNα2b抗病毒疗效的关系.pdfVIP

尺夕、、乙 个乙 HCV基因型与 IFN-a2b抗病毒疗效的关系 宋玉国 毕胜利 击希全 (李若伦教授指导) 摘要 目的:研究丙肝病毒墓因型与丙肝患者使用 IFN-alb治疗效果的 关系.方法:采用HCV墓因组NS5区PCR产物酶切分型方法，对 79例丙肝患 者做 HCV基因分型.所有病例均按预定方案应用 IFN-a2b治疗，根据 ALT的 变化情况判断疗效。首先考察应用 1MU和 3MUIFN-alb两种别量在治疗效果 上 的差异性;然后研究 HCV基 因型对 工FN-a2b治疗效果的影响.结果 :” 例 丙肝患者有HCVII型45例(5790),III型 28例 (35%),II/III混合型6例(8h).疗 程期满后考察疗效，其中 1MU和 3MU两种剂量在治疗效果上无显著性差异 (P0.05);45例II型HCV感染者中完全应答(CR)9例、部分应答 (PR)14例、 无应答(NR)22例，28例II型HCV感染者中CR16例、PR7例、NR5例;提示使 用 IFN-a2b治疗丙肝时，III型HCV感染者的疗效明显好于II型HCV感染者 (P0.01).结论:应用 IFN-a2b治疗丙肝时，不能盲目以增加剂量来提高疗 效，要更多考虑 HCV基因型的影响，HCV塞因型可能是预测疗效的一个重要指 标 . 关键词 丙型肝炎病毒;基因型;干扰素;聚合酶链反应;限制性内切酶 HCV基因组变异很大，在长期的演化过程中逐渐形成众多的突变株，即基 因型 ’〔〕。有人发现HCV基因型与HCV感染者的肝病程度，预后情况以及使用干 扰素 (IFN)的治疗效果可能存在某种相关性C2)。因此对 HCV进行基因分型具 有重要的临床应用价值。本文应用HCV基因组非结构区5(NS5)PCR产物酶切分 型法对HCV进行基因分型，以了解HCV基因型与基因工程千扰素(IFN-a2b)的 抗病毒效果的相关系。 一、材料与方法 1.试 剂 (1)抗-HCV检测试剂盒:购于厦门新创科技有限公司。批号:951218 (2)5-NC构PCR试剂盒:北京医科大学肝炎试剂中心提供。批号:951216 (3)NS5区 PCR试剂盒:北京医科大学肝炎试剂 中心提供 。960228 (4)NS5区PCR产物酶切分型所用限制性内切酶为promega和sigma公司 产 品。 PCR产物酶切后用 1090聚丙烯酞胺凝胶电泳，以HaeIII/PCR322作为分子量 标志物。电泳结束后EB染色观察结果。酶切分型方案见表1, 表].NS5区PCR产物醉切分型方案 HCV型别 限制性内切酶 酶切后片段((bp) II Alu1 209,114,50.8 III AluI 381 I Bal1 281,100 III Apa1 242,139 VI Mbo[ 266,115 2.研究对象 在抗一HCV阳性者中做 5’一非编码区(5-NC)PCR检测初选病例，然后用 NS5 区PCR检测确定研究对象。筛除乙肝病毒标志物阳性者和具有长期饮酒史的患 者。然后将79例丙氨酸转氨酶(ALT)异常且NS5区PCR阳性者作为本文研究病 例。其中男性50例，女性29例，平均年龄45.2111.6. 3.IFN-a2b杭病毒治疗方案和疗效$，,I断标准 全部病例均使用卫生部长春生物制 品研究所生产 的基因工程干扰素 (IFN- a2b)。肌肉注射，每周3次，共16周。其中42例应用了 1MUIFN-a26,37 例使用了3MU工FN-a2b。患者在整个治疗期间定期检查肝功，系统记录。检 查肝功的时间为用药前，用药后 1个月，2个月，4个月，共四次。干扰素疗 效判断依据肝功检查中的ALT变化分为: