鹅源副粘病毒单克隆抗体的制备及其特性鉴定.pdfVIP

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  • 2018-01-11 发布于广东
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鹅源副粘病毒单克隆抗体的制备及其特性鉴定.pdf

禽类传染病 3讨论 3.1 R值判定是用于两种抗原物质相似程度的有效方法,可用于不同物种蛋白抗原相似 性的分析。本试验采用R值分析方法即用双方的抗体分别与双方的抗原进行定量的反应, 经数学处理可以扣除试验误差,并综合双方的抗原抗体反应特性,用R值定量给出两种抗 原的相似程度。选择鹅源副粘病毒NA.1株与鸡新城疫病毒F48E9株,从交叉血凝抑制试验、 鸡胚交叉中和试验、细胞交叉中和试验、交叉攻毒保护试验四个方面系统的对鹅源副粘病毒 的抗原性作比较分析,交叉血凝抑制试验、鸡胚交叉中和试验、细胞交叉中和试验的抗原比 分别为0.446、0.50、O.56。抗原比值均小于O.6.根据抗原相关性判定标准该数值表明鹅源 副粘病毒NA.1株与鸡新城疫病毒F48E9相比,其抗原性发生了变化。同时也说明了鹅源副 粘病毒与鸡新城疫病毒能够发生交叉中和反应,两毒株的血清均可分别中和鹅源副粘病毒与 新城疫病毒,说明二者含有相同的抗原成分。但根据R值分析,可初步判断两者存在抗原 性的差异。该结论与本课题组进行的全基因序列比对及同源性分析结论相符。 3.2根据鹅源副粘病毒NA.1株与鸡新城疫病毒F48E9毒株的交叉血凝抑制试验和鸡胚 交叉中和试验表明,鹅源副粘病毒血清对鸡新城疫病毒的HI效价和50%血清中和终点与新 城疫病毒血清对鹅源副粘病毒的Hl效价和50%血清中和终点明显低于鹅源副粘病毒血渍对 鹅源副粘病毒的HI效价和50%血清中和终点,这可能导致用鸡新城疫疫苗免疫鹅免疫保护 率不高,但可用鸡新城疫血清检测鹅源副粘病毒。 3.3新城疫病毒只有一个血清型,不同毒株间仅存在通过单抗才能检出的微小抗原差 异,一般认为新城疫病毒抗原性保守,不易发生变异pJ。但近年来有报道认为新城疫病毒 抗原性发生明显变异,如澳大利亚已经发现新城疫病弱毒转变为新城疫病强毒的现象州。以 前国内外有关文献认为新城疫病毒从不感染水禽,即使是强毒感染也不表现明显的临床症 状,但鹅源副粘病毒病的发生与流行说明随着新城疫病毒对禽类易感谱的变化。以及新的基 因型的不断出现.新城疫病毒的毒力也在不断的变化,对此病的防制无疑又增加了新的难度。 由于国内对该病没有系统的研究,更没有配套的综合防御措施, 导致该病的流行发生呈现 扩大化趋势,并且已经对养鹅业造成很大的损失,严重威胁养鹅业的健康发展。 3.4目前,由于鹅源副粘病毒和鸡新城疫病毒均属于禽副粘病毒血清I型,常被认为是 鹅的新城疫,但鹅源副祜病毒属于F基因Ⅶ型毒株,而鸡新城疫病毒F48E9株属于F基因 Ⅱ型毒株,二者的抗原性存在差异,因此用新城疫疫苗免疫鹅群难以有效达到预防和控制鹅 源副粘病毒病的目的。我们在试验中也发现,对制苗毒株相同的毒株保护率高于对非制苗毒 株的保护率,这将提示我们.在预防和控制鹅源副粘病毒病中,应该选择与本地区正在流行 的、抗原性相近的、免疫原性好的、同源毒株作为疫苗株,才能有效的控制鹅源副粘病毒病 的发生和流行。 参考文献珞 鹅源副粘病毒单克隆抗体的制备及其特性鉴定15 刘新鑫。丁壮·,尹仁福,邱蜜蜜,刘关 (吉林大学预防兽医学国家重点学科动物重要嫡原与疲病研究室,长春古林130062) 摘要本实验主要研究内客是通过sPF鸡胚繁殖鹅l碌副粘病毒,然后差速爵·心和蔗糖密度梯度离心来纯化 鹕源副粘病毒,进而于I.14.28天免疫6.8周龄的BALB,c小鼠,在最后加强免疫后取小鼠脾细胞与骨髓 瘤细胞sP2,0系融合,再通过问接EusA方法,血凝试验等方法来筛选阳性杂交瘤细胞,进而得到三株阳性 x105,腹水1 杂交瘤克隆细胞lc6.2AI和2H7.通过问接ELIsA洲定,单抗兢价范围是:知胞培养上清1 ×105一l x107:经ELIsA法测定。三种单克隆抗体仅与试验的NA_1病毒株反应.而不能与小鹅痘,鹅鸭瘟 ”作者简介:刘新鑫(198,年一X女。吉林省吉社市人,现吉林大学在读硕士,主要从事动物及人兽共患 传染病舶免疫防治研究. ‘通讯作者:DinL曲u柚鲥势alloo.com.蜘 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会 病,鹅腺病毒性肝炎.鹅禽流感病毒等反应;单抗的亚类鉴定结果表明, lc6,2Al和2H7分泌的抗体为 IgGI亚类. 关键词鹅源剐粘病毒;融夸:单克f堂抗体

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