除草剂克无踪诱导黑斑蛙蝌蚪红细胞核异常研究.pdfVIP

除草剂克无踪诱导黑斑蛙蝌蚪红细胞核异常研究‘ 邵晨何成娥 摘 要 本文研究了除草剂克无踪在不同浓度和不同染毒时间对蝌蚪红细胞核异常的影响。 结果表明。五种不同浓度的克无踪染毒试验组均能诱发蝌蚪红细胞核异常，其核异常率明显升 高。同时随着除草荆作用时间的持续，蝌蚪红细胞核异常率也呈现一定的变化趋势。本试验 表明，蝌蚪红细胞核异常率测定法可作为对环境监测的一个指标，来监测除草剂对环境特别是 水环境的污染。 关键词 除草剂 克无踪 核异常 红细胞 蝌蚪 现代农业的迅猛发展提高了人民的生活水平，但由此产生的一系列负面效应也困扰着人类。 环境污染特别是农药污染尤其严重，化学农药长期、广泛和大量的使用加重了环境污染，并已危及 收，剩余部分可能会通过挥发进入大气，被径流和侵蚀带入地表水或被阳光降解；农药还会被土壤 生物转化成其他的化学形式，或随水向下沥滤到作物根区以下。使用农药相关的一个最大问题，就 是径流引起的污染(朱莉·斯托弗，2000)。在农田中施用农药后，残留于作物表面和土壤中的部分 农药会被雨水或灌溉用水冲刷而排入江河湖海，引起水域污染，危害水生生物(董治长，1993)。化 学农药大多是有害的，对人、生物或其他有价值的物质会产生即时的或潜在的危险，其主要表现在 有毒性、致癌、致畸、致突变性等(何燧源，2001)。除草剂就是其中影响比较大的一类农药，检测除 草剂对水体污染除了理化方法外，还可用生物学方法，即遗传毒理学方法(耿德贵等，2000；谢志浩 蝌蚪不同浓度和不同染毒时间下的红细胞核的异常情况进行了试验，旨在为除草剂的科学、安全使 用，减少环境污染提供科学依据。 1材料与方法 1．1材料 本试验选用的黑斑蛙(Rana 活泼和体表无损的个体作为试验蝌蚪，试验时间为2003年5月。 1．2药品 剂，又名百草枯，有效成分为1，1’一2甲基一4，4’一联吡啶阳离子(盐酸盐或三硫酸甲脂盐)，属杂 ·本研究得到浙江省自然科学基金资助(M303128)。 344 邵晨等：除草剂克无踪诱导黑斑蛙蝌蚪红细胞核异常研究 环类，本品极易溶于水，除在碱性条件下都很稳定(张殿京，1990)。 染色剂，可使细胞核着色为兰色或紫色。 Giemsa染色素倾入乳钵，加几滴甘油，在乳钵内研磨至无颗粒为止， Giemsa原液的制备：将lg 搅拌均匀，室温下放置2至3周后过滤，即得Giemsa原液，保存在棕色瓶中备用。 1．3试验方法 蝌蚪之前24h先将水接入缸内，以使漂白粉等成分挥发。试验设计对照组1个、试验组5个。在对 照组与试验组中均投放蝌蚪各20只，对照组不施加克无踪，试验组按一定的浓度梯度施加克无踪， 24h、48h及72h 5个时间段后分别于每缸随机取蝌蚪3只，断尾取血，每只蝌蚪各制一张血涂片。 每天更换处理液一次，以避免药物浓度变化和蝌蚪排泄物的影响。 然晾干。对照组蝌蚪血涂片的制备与试验组蝌蚪血涂片的制备完全一致。 无丝分裂、核质外凸、核质内凹、核内空泡、微核、双核等)的细胞数。再以总的核异常细胞数除以 观察到的细胞核总数即得核异常率。 2结果与分析 蝌蚪正常的红细胞多呈椭圆形，少数呈圆形，核异常包括无丝分裂、核质外凸、核质内凹、核内 空泡、微核、双核等。本次试验较常见的是核质外凸和核质内凹。经不同浓度克无踪染毒后的蝌蚪 红细胞核异常率在不同时间测定的结果见表1。 表1 克无踪对蝌蚪红细胞核异常的诱导 核异常率 在不同浓度(mg／kg)下的核异常率(‰) 染毒时间(h) 0 0．5 1．O 1．5 2．0 2．5 6 5．872 9．358 10．233 10．772 10．35l 13．570 12 5．930 10．280 10．785 10．940 11．317 12．147 24 6．107 9．875 10．884 11．014 10．297 12．381 48 7．150 8．775 9．836 10．545 10．466 1