5氟胞嘧啶热化疗对裸鼠肝癌治疗机理研究.pdfVIP

目 录 中文摘要……………………………………………………………………………………l 英文摘要……………………………………………………………………………………4 符号说明……………………………………………………………………………………8 前言…………………………………………………………………………………………………………………一9 第一部分…………………………………………………………………………………．．17 7 5．氟胞嘧啶热化疗体外细胞实验………………………………………………………一1 材料与方法……………………………………………………………………………18 结 果……………………………………………………………………………………………………………28 讨{仑……………………………………………………………………………………………………………35 第‘二部分………………………………………………………………………………37 5一氟胞嘧啶热化疗裸鼠肝癌模型体内实验……………………………………………一37 材料与方法……………………………………………………………………………38 结 果……………………………………………………………………………………………………………41 讨 论……………………………………………………………………………………………………………44 ／J、 结…………………………………………………………………………………………………………………．47 参考文献……………………………………………………………………………………48 综述…………………………………………………………………………………………………………………．58 致j射…………………………………………………………………………………………………………………．65 原创性声明…………………………………………………………………………．．66 llllIJfllfllffllff[ff[1lflgflflflflr llllUl Y1 806198 5．氟胞嘧啶热化疗对裸鼠肝癌治疗机理研究 研究生：张 成 专 业：普通外科专业 导 师：苏旅明 教授 中文摘要 目的 探讨组织特异性胞嘧啶脱氨酶／5．氟胞嘧啶(CD／5．FC)系统热化疗对转CD 系统热化疗对裸鼠肝癌的抑制作用。 方法 将质粒PCD2和G1 AFPCDNa在感受态细菌中大量扩增，碱法抽提质粒， 质粒PCD2用BamH1酶和EcoRl酶切鉴定，质粒G1AFPCDNa用Sal1酶切鉴定 8RPMll640 并测序；用脂质体法分别转染肝癌SK．HEP—l细胞，以含400mg／IG4l 培养液选择培养，14天后挑选抗性克隆并大量扩增，RT．PCR检测目的基因的 表达情况；在96孔细胞培养板中分别对两种转基因SK．HEP．1细胞进行前药 5．FC热化疗，MTT法测活细胞比率并计算细胞杀伤率，并比较两种转基因的细 细胞总RNA，用实时荧光定量PCR(Real．TimePCR)检测热化疗前后 表达有无差异。随后将90只裸鼠随机分为三组：对照组、AFPCD热疗组、 AFPCD非热疗组，每组30只，脾内注射法建立肝癌动物模型，对照组腹腔注射 生理盐水，热疗组腹腔注射43℃5一FC，非热疗