造血干细胞细胞周期的调节及其遗传学修饰.pdfVIP

造血干细胞细胞周期的调节及其遗传学修饰 TamaraSimon G．Kovalev曹善津苏立山 美国北卡罗莱那大学 【作者简介】 苏立山博士在哈佛大学获博士学位，斯坦福大学完成博士后，现任北 卡罗莱那大学助教授。主要从事造血干细胞发育及艾滋病病理研究及教学工作，获 Pilot奖。 Fellow，BasilO’Connor学者，Jefferson 奖包括Irvington 【摘要】造血干细胞具备自我更新和生成所有血液细胞系的能力。成年小鼠的造血 组织几乎每天要更替2．4x108个红细胞，4x106个非淋巴细．胞性外周血细胞，而且 还要代偿由于诸如失血、感染、细胞毒性物质摄入等造血压力所造成的造血之需。有 限数量的造血干细胞必须经过大量扩增以产生成熟的血液细胞群。尽管在任何时候 还是有75％的造血干细胞停留在G0期，然而造血干细胞会有规律地进入细胞分裂 周期，因为平均每57d，99％造血干细胞分裂一次，也就是说，造血干细胞群总是不断 地进／出细胞周期。因此造血干细胞为进行干细胞保存、细胞周期的活化／退出以及 分化研究提供了一个动态模型。另外，近年来，基于造血干细胞所进行的细胞和基因 治疗的临床应用也进行了广泛深入的研究。 1引言 造血是一个动态过程，即不断地产生髓系、红细胞系和淋巴细胞系细胞。成年小鼠的造血 组织每天要更替2．4x 108个红细胞，4x106个非淋巴细胞性外周血细胞，另外还要代偿由于 诸如失血、感染以及细胞毒性物质摄入等造血压力所造成的造血之需，这就要求对造血前体细 胞的增殖有严格的控制。造血系统的所有细胞均来自于造血干细胞，造血干细胞主要位于骨 髓。之所以称之为造血干细胞，在于其具备自我更新和产生所有的血液细胞系的能力。任何 时候，仅有5％造血干细胞处于细胞周期的s／c忍／M期，另外20％处于Gl期，其余75％则停 留在Gn期。尽管如此，所有的造血干细胞总是不断地进入细胞周期，因为平均每57d，99％造 血干细胞要分裂一次。因而，造血干细胞群总是不停地进／出细胞周期。 2造血干细胞的细胞表型及其功能测定 20世纪60年代早期3个奠基性的发现使得人们对于造血和血液学的认识和研究具有革 力。通过脾的克隆形成试验(eolony—forming—units 化为多个血液细胞的能力。第二，McGregor等证实淋巴细胞是获得性免疫的基础。第三， Miller表明胸腺对淋巴细胞的一个亚群一胸腺来源的细胞或称T细胞一的发育是必需的。这 一24— 些发现为这之后30～40年对于造血干细胞的调节、免疫系统的发育研究奠定了基础。 随着一些测定方法的建立，以及细胞转化技术的进展，造血干细胞克隆形成分析才成为可 能。首先，造血干细胞分化为多系血细胞的能力可通过脾的克隆形成试验，Dexter培养测定 证实，射线照射小鼠，长期(大于3—6个月)多系血细胞重建及其对小鼠的保护作用为造血干 细胞体内测定提供了确实的方法。第二，造血干细胞可依据一些表型标志通过流式细胞仪进 行分选富集。在C57BL—Thy Scal+Lin—e—kit+细胞，且具备造血干细胞的活性。 证实其具备造血干细胞样活性。首先，长期培养其可形成鹅卵石区域，并显示长期培养起始细 细胞已成功地用于病人的重建，但在其自然宿主一人体进行克隆生成测定尚不可能。 人和小鼠的造血干细胞均可通过其细胞周期的状态和活体染料的拒染试验加以富集纯 化。例如，造血干细胞可通过其体积小，或通过其RNA水平低，采用RNA结合染料焦宁(py． 123)或DNA结合染料 ronin)Y加以富集。另外，线粒样结合染料若丹明(rhodamine)123(Rho Hoeehst 和代谢不活跃的细胞群体。 3造血干细胞细胞周期的调控：自我更新和血液细胞系分化 人和小鼠的整个生命期内，造血干细胞可以自我更新和分化成多个血液细胞系。曾经提 出过两种模型。克隆演替假说(或银行账户假说)，这一假说解释了于细胞是如何协调细胞周 期事件以满足造血需求的。这个模