马桑中黄酮的免疫调节作用研究.pdfVIP

第七届全国磷化学化工暨第四届海峡化学生物学、生物技术与医药发展讨论会 The7t}INationalConferenceonPhosphorousChemistry＆Engineering F27 马桑中黄酮的免疫调节作用研究 张雁冰+戴桂馥侯立芬寇娴刘宏民 郑州大学新药研究开发研究所河南郑州450052 摘要为探讨马桑的药理作用对其中分离出的黄酮进行了免疫调节作用的研究。测定了对ConA诱导的小鼠 T淋巴细胞增殖的抑制作用和LPS诱导的小鼠B淋巴细胞增殖的抑制作用。实验结果表明黄酮对小鼠的T和B 细胞增殖有很高的抑制活性，山奈酚糖苷对淋巴细胞的增殖的影响表现出多样性。 关键词：马桑：黄酮：免疫调节；淋巴细胞增殖；MTT比色法 马桑叶为马桑科植物马桑(CoriariasinicaMaxim)的叶子，马桑在我国具有广泛的植物资源，马桑叶主要 结合为苷的形式广泛地存在于自然植物中。黄酮类化合物不仅数量繁多，而且结构类型复杂多样，具有低毒、 广谱的药理活性‘3’1”，是植物药开发的重点。由于黄酮在马桑中不仅含量高，而且种类多，为了深入研究马桑的 药理活性，作者对所分离出的系列黄酮(见图1)进行了免疫调节生物活性评价。 H H HO OHO H(Q) 1．R_p-D—Gal(K·Gal)4．R2 2．R=c【-L—Am(K-Ara)5．R=a-L-Ara(Q-Ara) 3．R=p-D-Glu(K—Glu)6．R=p—D—Gal(Q—Gal) 图1马桑中所分离出黄酮的结构 1．实验材料 1．1仪器 德国Btlchi：Powerwave X酶标仪(美国BIO．TEK公司)：二氧化碳恒温培养箱(美国WTE Mettler 波江降仪器厂)：立式压力蒸汽灭菌器(上海医用核子仪器厂)，无菌操作台(上海医用核子仪器厂)。 1．2药品与试剂 产品)、细菌脂夕糖(Lipopolysaccharide，LPS，Sigma产品)：所用化学试剂均为分析纯。 2．实验方法 2．1低渗液的配制 ‘E-mail：Zhangyb@,zzu．edu．cn 基金项目：河南省科学自然科学基金资助项目0311040900 作者简介：张雁冰(1958．1l一)，女，博士，教授，硕士生导师。研究方向：天然产物化学。 239 2006年4月8·12日中国·郑州 第七届全国磷化学化工暨第四届海峡化学生物学、生物技术与医药发展讨论会 Tho7thNationalConferenceon PhosphorousChemistryEngineering 卫盟￡鲤丛￡堂￡：S照鲢S幽殴§iⅡ也蛆￡h§皿i剑旦iQ!鲳墨旦iQ!Qgi璺垦!里曼盟堡Q!Q敬星丛西邋趔麴￡!鲤些塑! 称取Tris 1．79，NH4CI 2．2ConA、LPS溶液的配制 称取Con A、LPS固体适量，用含10％FBS血清培养液溶解，使其反应终浓度分别为4pg／mL、3gg／mL。 2．3小鼠脾淋巴细胞的制各 小鼠脱颈致死，放在75％的酒精中浸泡3-～5min；无菌操作取脾脏，用匀浆器匀浆、过滤，将滤液摇匀分 装至离心管中，4。C 以低渗液处理至离心后的细胞沉淀中红色消失为止；然后每管加入少量PBS吹打，于4。C 等量MTT溶液(终浓度0．5 离心5min； 轻轻吸弃上清，每孔加入异丙醇15