大黄多糖对TNBS诱导结肠炎症鼠Th1和Th2细胞极化的影响研究.pdfVIP

大黄多糖对 TNBS 诱导结肠炎症鼠 Th1 和 Th2 细胞极化的影响 刘莉 梅其炳* 王志鹏 曹晓林 张蓉 李晨 龙铟 周四元 第四军医大学药理教研室 陕西 西安 710032 国际自然科学基金资助项目 No 摘要 目的 观察大黄多糖 Rheum tanguticum Polysaccharide RTP 对 TNBS 诱导不同背景 鼠性结肠炎症的影响 研究 RTP 治疗结肠炎症的免疫作用机制 探讨中药多糖产生免疫作用 的信号途径 方法 采用 TNBS/ 乙醇复制大鼠/小鼠结肠炎症模型 以200 mg·kg-1RTP 灌胃 5 天进行治疗 观察 RTP 对结肠炎症 SD 大鼠和 BALA/c 小鼠死亡率 结肠重量 溃疡面积和 MPO 活性的影响 + 采用流式细胞术和免疫组化法观察 RTP 对结肠炎症鼠 CD4 T 细胞扩增的 对抗作用 以Elisa 夹心法观察 RTP 对 CD4 +T 细胞亚型 Th1 和 Th2 所分泌的细胞因子 IFN 和 IL-4 的影响 结果 TNBS/ 乙醇复制的大鼠/小鼠结肠炎症模型显示出 Th1 和 Th2 细胞反应 有所不同 在 SD 大鼠产生的肠道炎症主要是以 Th1 反应 IFN 产物占优 为主的免疫反应 而 TNBS 诱导 BALA/c 小鼠产生的肠道炎症主要是以 Th2 反应 IL-4 产物占优 为主的免疫 反应 RTP 对这两种不同免疫状态的鼠性结肠炎症均具有良好的治疗作用 溃疡面积 P0.01 + + 结肠重量 P0.01 MPO 活性 P0.01 对血液 CD4 T 细胞的扩增和结肠粘膜 CD4 T 细胞的浸 润均具有明显的对抗作用 抑制 SD 大鼠结肠炎症时 Th1 细胞分泌的 IFN 的升高 P0.01 也对抗 BALA/c 小鼠结肠炎症时 Th2 细胞分泌的 IL-4 的升高 P0.01 结论 RTP 对于 Th1 细胞占优势的免疫状态和 Th2 细胞占优势的免疫状态均具有良好的调节作用 提示中药多糖 治疗自身免疫性疾病具有良好的前景 0 引言 炎症性肠病 inflammation bowel disease IBD 包括溃疡性结肠炎 ulcerative colitis UC 和克隆氏病 Crohn s disease CD 以反复发作的肠道炎症为特点 研究表明 过度的 Th1 或 Th2 细胞活性介导其炎症反应 主要与 Th1 分泌 IL-12 和 INF 或 Th2 分泌的 IL-4 和 IL-10 相关[1-2] TNBS 诱导大鼠产生的肠道炎症主要是以 Th1 反应为主的免疫反应 与人类的 CD 较 为类似 而 TNBS 诱导 BALA/c 小鼠产生的肠道炎症则是以 Th2 反应为主的免疫反应 是研究 [3-4] 人类 UC 良好的动物模型 我们以前的实验可见 大黄多糖 Rheum tanguticum Polysaccharide RTP 对 TNBS 诱导的大鼠肠道炎症具有良好的治疗效果[5] 其机制与抑制结肠炎症大鼠 CD4 细胞的扩增 expansion 有关[6] 然而 RTP 影响 CD4 的机制尚不清楚 为阐明 RTP 治疗结肠炎 症的免疫机制 探讨中药多糖产生免疫作用的信号途径 本实验采用 RTP 观察对 TNBS 诱导不 同背景鼠性结肠炎症的影响 1 材料和方法 1.1 实验动物 二级 BALA/c 小鼠 60 只 体重 18-22g Sprague-Dawley 大鼠 37 只 体重 220-250g