天智颗粒对脑线粒体损伤大鼠纹状体细胞外液乙酰胆碱和生物胺的影响研究.pdfVIP

天智颗粒对脑线粒体损伤大鼠纹状体细胞外液乙酰胆碱和生物胺的影响 孙晓芳 王巍 王丹巧 赵德忠 中国中医研究院西苑医院老年病研究所 北京 100091 [摘要] 目的 观察天智颗粒 TZ 对脑线粒体损伤大鼠纹状体细胞外液乙酰胆碱 ACh 和 生物胺类递质的影响 探讨促智中药 TZ 的神经保护作用机理 方法 应用微透析技术和高效液相 色谱相结合 建立清醒自由活动大鼠脑内灌流叠氮钠 NaN 3 造成局部脑区线粒体能量代谢障碍的 急性模型 动态监测TZ 对模型大鼠脑细胞外液ACh 胆碱 Ch 和生物胺类递质水平的影响 结 果 NaN 3 灌流后 大鼠纹状体细胞外液中 ACh 去甲肾上腺素 NE 肾上腺素 E 3,4-二羟 基苯乙酸 DOPAC 多巴胺 DA 和高香草酸 HVA 水平均显著下降 P0.05~0.01 ,Ch 水平 则明显升高(P0.01) 停止NaN3 灌流后 各递质水平逐渐恢复 TZ 可延缓模型大鼠脑内ACh 水平 的降低 促进Ch 水平的恢复 与都可喜合用升高模型大鼠ACh 水平的作用显著优于单用TZ 或都 可喜 TZ 还有延缓单胺类递质水平降低和促进其恢复的趋势 与都可喜合用可促进DOPAC 水平的 恢复 对DA 的代谢异常具有积极的调节作用 结论 TZ 对线粒体损伤 能量代谢障碍引起的胆碱 能神经系统的损伤具有保护作用 并与都可喜有协同作用 对肾上腺素能 多巴胺能神经系统的损 伤 TZ 也有保护的趋势 [关键词] 天智颗粒 微透析 叠氮钠 乙酰胆碱 生物胺类递质 天智颗粒 TZ 是以天麻钩藤饮化裁而成 具有平肝熄风 清热活血 补肾益智之功效 临床 观察表明TZ 可改善血管性痴呆 VD 病人的学习记忆能力 多项研究提示其益智作用与神经保护 作用密切相关[1~4] 乙酰胆碱 ACh 胆碱 Ch 和生物胺类物质是脑内重要的神经递质 通过测 定脑内 ACh Ch 肾上腺素 E 去甲肾上腺素 NE 多巴胺 DA 及其代谢产物的含量可以 分别反映脑内胆碱能 肾上腺素能和多巴胺能神经系统的功能 本研究应用叠氮钠 线粒体呼吸链 复合物 抑制剂 NaN 3 脑内灌流造成大鼠局部脑区线粒体损伤的急性模型 动态监测TZ 对模型 大鼠细胞外液ACh 和生物胺水平的影响 进一步探讨其益智作用的机理 1 材料和方法 1.1 动物 SD 大鼠 体重 250-350g 购于北京维通利华实验动物技术有限公司 许可证编号 SOXK(京)2002-0203 1.2 试剂与药品 氯化乙酰胆碱 Acetylcholine chloride 为Aldrich 公司产品 氯化胆碱 Choline chloride 去 甲肾上腺素 (-)-Arterenol NE 肾上腺素 (-)-epinephrine E 3 4- 二羟基苯乙酸 1 3,4-Dihydroxyphenyl-aletic DOPAC 多巴胺 3-Hydroxytyramine DA 高香草酸 4-Hydroxy-3-methoxy-phenyl HVA 甲基硫酸新斯的明 Neostigmine methyl Sulfate SA 高 氯酸钠 Sodium perchlorate 1-庚烷磺酸钠盐 1-heptanesulfonic acid sodium salt HAS 三乙胺 triethylamine TEA 乙二胺四乙酸四钠 ethylenediaminetetraacetic acid tetrasodium salt Na EDTA 4 均购自Sigma 公司 叠氮钠 Sodium azide NaN 3