向文胜 超高效液相色谱.pptVIP

超高效液相色谱UPLC/Q-TOF MS 主讲人：向文胜 ACQUITY UPLC? 超高效液相色谱（Ultra Performance LC?）是分离科学中的一个全新类别，它借助于HPLC的理论及原理，涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术，增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。 今天的HPLC科学描述 今天HPLC分离的品质取决于色谱柱的填料；同时也被其所限制。改进色谱柱填料的性能可以给色谱过程带来速度、灵敏度及分离度均大幅提高的好处 填料的颗粒度对色谱柱性能的贡献最大 速率理论 1956年 Van Deemter 等人在塔板理论的基础上，提出了关于色谱过程的动力学理论——速率理论。 该理论采用塔板高度的概念，但同时考虑到H还取决于同一组分的不同分子在柱中差速迁移过程中所引起的色谱蜂扩展程度，将色谱过程与组分在两相间的扩散和传质过程等动力学因素联系起来，从理论上总结出影响塔板高度的各种因素。 van Deemter方程 dp —固定相颗粒平均直径 ?—填充不规则因子 Dm—组分在流动相中的扩散系数（cm2/s） —弯曲因子，亦称阻碍因子 ?—由柱填充性决定的因子 q—与固定相性质有关的因子，均匀液膜 q为2/3 df—液膜平均厚度 Ds—组分分子在固定液中的扩散系数 填料颗粒尺寸的演变 更小的颗粒度…… 填料颗粒尺寸的演变 UPLC?的技术成就 小颗粒色谱填料（化学品） 超高压输液单元（能达到15,000psi） 降低系统体积并优化流体路径 降低自动进样器进样周期的时间、减少交叉污染 超高速检测器，包括光学及质谱检测器 新的色谱单元之间的通讯协议 功能齐全的诊断功能 为系统完整性而专门设计的软件 系统的技术超高效由设计而来 Ultra Performance LC? 速度、灵敏度与分离度的结合 Ultra Performance LC? 速度、灵敏度与分离度的结合 Ultra Performance LC? 与HPLC一样的重现性 Ultra Performance LC? 与HPLC一样的耐受性 Ultra Performance LC? 先进的MS入口技术 － 代谢物ID 液相色谱/质谱接口技术及特点 ESI特点 ESI电喷雾状态 APCI特点 高分辨串联质谱QTOF micro 显著特点是灵敏度高(pg-fg级)和选择性强得到的质谱谱图数据完整、品质高。因而，在天然产物，新药开发，药代研究和蛋白质组学领域的定性、定量分析研究方面占有重要地位。 四极杆质量分析器－高性能碰撞室－TOF串联质谱 Q-TOF MS示范动画 The End Thank you Slide 4 - What has this migration towards smaller particles meant to the separation process? Let’s take a look at the promise of smaller particles with a brief discussion about the van Deemter plot. The van Deemter plot show that smaller particles provide not only increased efficiency but also this efficiency is optimized at a flow rate that is specific to the particle size so that every particle size has a flow “sweet spot” for best efficiency (flow is expressed as linear velocity to remove column dimensions from the equation) The van Deemter also shows that smaller particles provide the ability to take advantage of this efficiency over a wider flow range. So what would happen if particle size becomes significantly smaller? If we think about how we address these challenges today we are both driven and limited by the chemistry we use. Better chemistry