基于石墨烯薄膜修饰电极的酶催化系统对2,4-二氯苯酚的检测.pptVIP

最近,基于酶反应的电化学传感器在痕量分析上显示竞争优势，因为其高的放大效应和对酶的选择性高。大量的测定酚化合物的生物传感器被广泛报道。在大多数的这些实验中,已经进行了很多尝试来提高灵敏度和通过酶固定在不同的材料来提高稳定性。石墨烯因为它的独特的物理化学性质吸引了国际关注，如高表面积,高电荷传输流动性,好的电催化活性和强大的机械强度。石墨烯的这些特性，特别是便于酶组装可以用来制造电化学生物传感器。最近,一些研究者发现石墨烯对苯酚也有良好的吸收能力，这将有利于酚类化合物在电极上的富集。考虑到高的导电率、高固定化酶能力和对苯酚强的吸附性能,石墨烯应该是一个好的制备2,4-DCP生物传感器材料。 2.2 石墨烯的制备 石墨稀氧化物是由天然石墨粉通过一种改进的电化学方法制得的。通常,通过超声波法，将石墨烯氧化物溶解在水中可以形成质量分数为0.1%的分散液。然后将获得的棕色分散液在3000 rpm转速下离心分离30分钟后移除没有溶解的石墨氧化物。然后将均匀的石墨烯氧化物分散液(5.0毫升)在50摄氏度下搅拌12 h。冷却到室温后，在制得的分散液中加入3.5微升肼溶液和40.0微升的氨溶液。在充分搅拌和振荡几分钟后,将瓶子油浴(95℃ )1 h以获得稳定的黑色分散液。将分散液通过尼龙膜过滤(0.22微米)来获得石墨烯。 2.3 基于石墨烯2,4-DCP生物传感器的制备 基于石墨烯的传感器的制备过程如下：将2毫克石墨烯加入到1毫升的1.0%（W/V）的壳聚糖水溶液中，通过超声破碎法形成均匀的分散液。将50微升的HRP加入到50微升质量分数为2mg/mL的石墨烯壳聚糖水性悬浮液中，为了吸附HRP，将此混合溶液在室温下充分振荡30分钟。经过吸附过程，通过注射器，将5微升上述的混合液分散到预处理过的玻碳电极表面。将电极在4℃下自然晾干，如果不用的话，将修饰电极储存在4℃。 2.4 2,4-DCP的检测 2,4-DCP的测定是在室温下在含有H2O2的0.1M pH为7.0的PBS溶液中进行的。对于电流的检测，所以的测量值都是在运用一个最适当的电势（相比甘汞电极而言）加到工作电极上，并在加入2,4-DCP以后，相比较未加入的电势，电势基流会衰减到更稳定的状态。在加入了2,4-DCP以后，我们对电流峰值变化做了记录。在所以的极普法测量中，要通过充分搅拌溶液来获得对流运输。 3 结果与讨论 3.1 石墨烯的特性描述 3.2 基于石墨烯的生物传感器对检测2,4-DCP 的可行性研究 3.3 检测的优化 图1 （A）拉曼光谱对散装石墨（a）石墨烯氧化物（b）和石墨烯（c）；(B)石墨烯的TEM图片；(C)石墨烯的SEM图片;(D)石墨烯壳聚糖复合物的SEM图片。 图2 石墨烯壳聚糖溶液的照片(A)和石墨烯水溶液照片（B） 方案1 使用HRP/石墨烯修饰玻碳电极检测2,4-DCP的示意图 图 3（A）HRP/石墨烯生物传感器在不同溶液中的循环伏安图 图3（B） HRP/石墨烯生物传感器在不同溶液中的安培电流图 3.3检测条件的优化 HRP浓度的影响 底液pH值的影响 电极电势的影响 过氧化氢浓度的影响 3.3.1 HRP浓度的影响 图4 Effect of HRP concentration on the biosensor response to 1.0 uM2,4-DCP in 0.1 M pH 7.0 PBS containing 100.0 uMH2O2 at 0.25 V (vs. SCE). 3.3.3 电极电势的影响 图 6 Effect of applied potential (vs. SCE) on the biosensor response to1.0 mM 2,4-DCP in 0.1 M pH 7.0 PBS containing 100.0 mMH2O2. 3.3.4 过氧化氢浓度的影响 图 7 Calibration curves for 2,4-DCP determination with HRP/graphene sensor in the presence of (A) 10.0, (B) 50.0, (C) 100.0 and (D) 200.0uM of H2O2 in pH 7.0 PBS. Applied potential: -0.25 V vs. SCE. Insetwas the dependence of the sensitivity of the HRP/graphene biosensor onH2O2 concentration (S, sensitivity). 3.4