半枝莲对宫颈癌细胞钙信号系统的影响分析.docVIP

精品论文 参考文献 半枝莲对宫颈癌细胞钙信号系统的影响分析 吴梓春 （佛山市第一人民医院 528000） 【摘要】目的 探讨半枝莲对宫颈癌细胞钙信号系统的影响及其抗癌机制。方法　利用荧光染料Fura-2能够与细胞内游离钙结合的特性，根据荧光强度判断细胞内游离钙的变化。结果　半枝莲对宫颈癌细胞增殖的抑制作用并不明显，但是能够通过促进细胞内储藏钙的释放与细胞外钙离子的内流，明显提高细胞内游离钙浓度。结论　半枝莲的抗癌作用可能在于诱导癌细胞进入凋亡，其抗癌作用机制值得临床进一步研究。 【关键词】半枝莲 宫颈癌细胞 钙信号系统 临床分析 【中图分类号】R285 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）18-0131-01 宫颈癌是临床常见的女性生殖道恶性肿瘤，在中医学领域属于带下、漏症、症瘕范畴，多因脏腑气血失调，湿毒内侵，损伤冲任而致[1]。大量临床实践表明，采用中药治疗早期宫颈癌有助于改善患者全身状况，增强机体免疫力，提高患者生存质量[2]。目前临床上对于半枝莲抗癌药理作用研究较多，但有关半枝莲对癌细胞钙信号系统的影响研究较少，本研究中将宫颈癌细胞作为研究对象，观察中药半枝莲在发挥抗癌作用过程中对细胞内游离钙浓度的影响，现报道如下： 1 材料和方法 1.1材料 Fura-2，宫颈癌细胞（Hela,源自上海细胞生物研究所），中药半枝莲，EGTA，ATP，TritonX-100,Ionomycin。 1.2方法 将宫颈癌细胞在不同条件下进行培养，其中对照组宫颈癌细胞在RPMI1640（含有10％小牛血清）的培养液、37室温、5％CO2条件下进行培养。观察组在上述条件下培养24h后，置入含有半枝莲的培养液（半枝莲浓度为每4ml培养中含有15mu;L浓度为1.5g/ml母液）中连续培养备用。测定半枝莲的抗癌活性与两组宫颈癌细胞胞浆游离钙浓度。 2 结果 通过对连续培养0—5d，处于生长周期内的宫颈癌细胞进行连续MTT检测，发现中药半枝莲对宫颈癌细胞的抑制作用在培养第3d时达到高峰，随后其抑制作用明显下降。连续检测过程中半枝莲对宫颈癌细胞的杀伤率（对照组吸光度值/对照组吸光度值-观察组吸光度值/对照组吸光度值）始终＜50％，表明癌细胞对中药半枝莲不敏感，其对于宫颈癌细胞的抑制作用并不明显。观察组在半枝莲作用下细胞内游离钙浓度明显高于对照组，p＜0.05。半枝莲对宫颈癌细胞增殖的影响见表1，半枝莲对宫颈癌细胞内游离钙浓度的影响见表2。 表1 半枝莲对宫颈癌细胞增殖的影响 3 讨论 肿瘤作为危害人类健康的首要疾病，临床在寻求与应用抗肿瘤药物的同时，往往存在药物在作用于靶细胞时累计正常细胞的情况，且化学药品的开发十分昂贵，在临床上推广普及也需要较长时间[3]。近年来，人们将目光逐渐转向中药，试图从中草药的天然成分中寻找毒副作用较小的抗肿瘤药物。半枝莲是黄芩属植物，在《药镜拾遗赋》中记载“半枝莲，解蛇伤之仙草”，我国半枝莲资源较为丰富，主产于江西、江苏、广东、福建等地，可用于疥疮肿毒、跌打伤痛、虫蛇咬伤、肾炎水肿、传染性肝炎等疾病的治疗[4]。 半枝莲的主要化学成分为黄酮类化合物、多糖类成分、二萜及二萜内酯类化合物、微量元素及有机酸、甾醇等其他成分[4]。其中半枝莲醇提物对移植性肿瘤具有明显抑制作用，可通过增强机体免疫力实现其抗肿瘤作用。半枝莲多糖则可通过体外粗军ConA诱导机体脾细胞淋巴细胞转化，明显提高机体外周血淋巴细胞中酯酶阳性细胞百分率，对细胞免疫有显著促进作用。同时可以明显对抗香烟焦油凝聚物对淋巴细胞的损伤作用，保护淋巴细胞DNA。本研究中，利用荧光染料Fura-2能够与细胞内游离钙结合的特性，根据荧光强度判断宫颈癌细胞呢游离钙浓度的变化，结果表明半枝莲对宫颈癌细胞增殖无明显抑制作用，但能够明显提高细胞内游离钙浓度，从而诱导癌细胞凋亡。 参考文献 [1]宋寄春,谭诗云,陈明锴.半枝莲对人大肠癌细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用[J].咸宁学院学报(医学版),2007,21(2):106-108. [2]肖海涛,李铣.半枝莲的化学成分[J].沈阳药科大学学报,2006,23(10):637-640. [3]李洁,石俊英.半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞端粒酶活性的影响[J].中药药理与临床,2006,22(3):113-114. [4]林敬明,刘煜,罗荣城.半枝莲提取物抗人肝癌Hep-G2细