分子标记辅助育种在水稻育种中的应用.pdfVIP

园艺与种苗 DNA多态性的分子标记方法。 1．5 内部简单序列重复(inter—simple sequence re— 1．4 简单序列重复(simple sequence repeat．SSR) peat，ISSR) 简单序列重复又称微卫星DNA。它是利用某个 ISSR的引物通常为16～l8个碱基序列，由l～4 微卫星DNA两端的保守序列设计1对特异引物，扩 个串联重复和几个非重复的锚定碱基组成，其引物 增这个位点的微卫星序列，经聚丙烯酰胺凝胶电泳 的特殊性保证了引物与基因组DNA中SSR的5或 显示不同基因型个体在这个位点多态性的一种分子 3末端结合，是可以检测出基因组许多位点差异的 标记技术。它可以检测出复等位的差异，可以用PCR 一 种新兴的分子标记技术。 扩增检测SSR多态性，还可以用SSR作探针检测动 2 几种常用分子标记辅助育种技术优缺点 植物基因组所含的重复序列，常表现为共显性。由于 分子标记辅助育种技术很多，但每一种都有其 它的优点很多，所以在遗传图谱构建、基因定位、品 优点与缺点，正确认识各种技术的优缺点，能够在应 种鉴定、种质资源保存和利用等方面都有非常广泛 用中取长补短，选择最适合的方法。几种常用分子标 的应用嘲 记辅助育种技术优缺点见表1。 表1 几种常用分子标记辅助育种技术优缺点比较 RFLP 呈孟德尔遗传，不受环境影响，标记数量多，试验结果稳定可靠，在RFLP分析需要的DNA量大(5～10 曲，纯度高；试验操作复 遗传上呈现共显性，可以区分纯合基因型和杂合基因型，非等位的杂，周期长；探针具有种属特异性，每一探针能检测的位点 RFI P标记之间不存在上位性效应 少，只能检测内切酶识别位点上的变异，能提供的信息有限 RAPD 与RFLP相比，RAPD技术的优点是效率高，样品用量少，灵敏度 RAPD标记为显性遗传，不能区分纯合基因型与杂合基因 高和特异性强，设计引物不需知道序列信息等 型，且受反应条件的影响很大，结果的稳定性和重复性差 AFLP 具有共显性和显隐性，稳定可靠，重复性好，多态水平最高，检测 对模板反应迟钝，DNA质量要求较高，谱带可能发生错配与 位点最多，操作简便，分子识别率最高，快速高效，无复等位效 缺失，需要同位素检测，对技术要求高，成本较高，试验耗资 应，TM值高，DNA用量少等 较大 SSR 表现多为共显性遗传，遵循孟德尔遗传法则；数量丰富，广泛分 SSR引物具有高度的种属特异性，开发和合成新的SSR引物 布于整个基因组；对DNA数量及纯度要求不高，易于利用PCR 费用高、难度大 检测；试验操作简便，结果稳定，重复性强[31 1SSR 引物设计简单，多态性较RFLP、SSR、RAPD丰富，可重复性和稳 有些ISSR引物可能在特定基 组DNA中没有配对区域而 定性好于RAPD等特点 无扩增产物 3 分子标记辅助育种在水稻育种中的应用 因 一J、 一2回交聚合到两系杂交水稻光温敏核不 3．1主基因的回交转移和聚合 育系培矮64S中，并且筛选得到了10株改良株系， 3．1．1与品质相关基因的转移和聚合。王岩等[5I把中 改良了该系的抗瘟性。 国香稻的alK和fgr等位片段导入明恢63，获得了 阳海宁等[8]利用回交与分子标记辅助选择相结 稻米糊化温度明显降低，胶稠度升高，具有香味，且 合的方法将抗稻白叶枯病基因Xa23导入主栽杂交 心白粒率有所降低的改良品系。刘巧泉等E61~lJ用分子 水稻品种的保持系先B、天B、盟B、龙特甫B和桂B 标记辅助选择育种技术，经回交转育向籼型常规稻 中，获得了稳定的单抗性基因导入系1436份和双抗 品种特青导人优质籼稻(中等直链淀