THY1作为潜在的肿瘤标志物在多种恶性肿瘤组织中表达的研讨.pdfVIP

中国科协第四届优秀博士生学术年会论文集 THY．1作为潜在的肿瘤标志物在多种恶性肿瘤组织 中表达的研究幸 陈晋峰孙潞郑庆锋陆爱萍杨跃 北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院胸外科二病区，北京，100036 摘要 目的：探讨组织芯片在免疫组化中的应用以及Thy．1蛋白在人体多种常见肿瘤申 的表达特点，并检测部分肺癌组织和正常肺组织中Thy一1基因的外显子序列，以期了解 Thy．1基因在肺癌发生过程中的作用。方法：以组织芯片的形式，应用Thy．1单克隆抗体， 采用免疫组化信号催化放大(CatalyzedSignal 例人体恶性肿瘤和144例正常或良性肿瘤组织中Thy．1蛋白的表达情况，详细了解Thy．1 基因在多种恶性肿瘤中是否存在异常表达．结果：在人体正常组织和良性肿瘤以及恶性 肿瘤组织中，Thy．1蛋白的表达分布具有明显的不同。在所有的145l例有效的恶性肿瘤 组织中，734例(50．59％)组织中显示出较强的Thy．1蛋白的核内表达；而在所有的正 常组织中Thy．1在胞浆中表达或阴性表达；只有6例慢性宫颈炎组织中有Thy．1的核内 表达。结论：Thy．1蛋白在恶性肿瘤组织中的异常分布．-j-以作为一种潜在的肿瘤标志物， 在恶性肿瘤的诊断、鉴别诊断中将会发挥重要的作用，分子水平机理的进一步研究将有 助于揭示Thy．1蛋白在肿瘤发生过程中的作用． 关键词肿瘤学；Thy．I／CD90；恶性肿瘤；免疫组织化学染色 Thy．1是40年前从鼠脑组织中发现的一种细胞膜蛋白，含有免疫球蛋白V结构域，属于细胞黏 附因子中免疫球蛋白超家族成员，是胸腺细胞的分化抗原，与T细胞的细胞识别以及功能分化之间存 多正常组织中均有表达，例如纤维母细胞、内皮细胞、卵巢、乳腺、皮肤、平滑肌细胞等‘1，2’3·41。我们 前期的研究首次证实了Thy．1在肺癌中的表达特点【5】，本研究中，我们采用组织芯片的形式，以免疫 组化的方法详细了解Thy．1蛋白在其他实体恶性肿瘤中的表达特点，以期了解Thy．1蛋白的异常表达 在肿瘤恶变过程中的作用。 1 材料与方法 1．1组织芯片及主要试剂 选取多种实体良恶性肿瘤及正常组织类型的组织芯片，购自超英生物公司。单克隆抗Thy—l抗体购自 Research (CatalyzedSignal 2200，Alpha ‘基金项目：北京市卫生局科研基金资助(2003-049) 160 生物技术 Innofeeh公司产品，电泳仪为Bio．Rad公司产品。 1．2免疫组化及阳性结果的判断 参考文献介绍的方法【6】，采用微波抗原修复，CSA免疫组织化学染色方法进行Thy．1和p53抗体染色。 用已知Thy．1阳性的纤维组织标本切片作为阳性对照；用PBS代替一抗或生物素标记的二抗作为阴性对照。 纤维组织标本显示Thy．1在细胞浆中有棕黄色或棕褐色染色，恶性实体肿瘤组织中Thy．1抗体出现细胞 核染色阳性，而在大多数良性肿瘤和正常肺组织中只有较弱的细胞浆染色。根据Thy．1抗体细胞核染色程 度和着色细胞百分数分为：阴性(．)，所有细胞核均无着色或着色细胞百分数小于10％；阳性(+)，着色 细胞核的细胞百分数大于10％。所有染色结果均经两位有经验的病理科医师分别作出判断。 2结果 Thy．1在实体肿瘤中的表达状况 织中Thy．1核染色阳性的情况，而在良性肿瘤和正常组织中Thy-1染色常为阴性或是在细胞浆中，只有6例慢 性宫颈炎的标本中显示Thy．1核染色阳性。所以Thy．1在良恶性组织中的染色特点具有明显的差异。 3 讨论 Thy一1蛋白是一种首先在小鼠脑组织和胸腺组织中表达的一种细胞膜表面抗原。在脑组织中，Thy·l 主要在脑组织中的神经元中表达，它是神经系统中表达量最多的细胞表面糖蛋白，占所有膜蛋白的2～7 ％【7】。目前尚不知Thy．1蛋白在神经系统中的具体功能，但其在细胞生物反应过程中发挥着重要的作用。 Thy．1可能会影响细胞黏附、信号传导以及不同类型细