临床微生物检验在感染诊治中的作用课件PPT.ppt

* 内容提要 主要议题： 微生物室的概况 耐药监测，帮助医生经验选药 规范标本采集及常见标本类型的案例分享 临床与微生物检验中常见问题的讨论 规范微生物标本采集 * 微生物检查的标本收集原则 无菌采集 无菌容器 及时足量 迅速送检 * 及时运送 苛养菌中除卡他莫拉菌外，流感嗜血杆菌和肺炎链球菌对干燥、寒冷的抵抗力均较弱，在标本离开机体后其存活率十分低。 对环境抵抗强的细菌（铜绿假单胞及其他G阴性菌、葡萄球菌、念珠菌等）2-4h繁殖数代，影响定量结果。 * 送检标本种类与临床意义 临床意义较低的标本： 痰、咽拭子（HI、SP、A链、溶血隐秘杆菌除外） 粪便、肛拭子（致腹泻病原菌和艰难梭菌CD） 临床意义中等的标本： 尿 脓液、伤口分泌物 临床意义较大的标本： 血、CSF、胸腹水、及其他无菌体液 * 常见标本类型的案例分享 * 常见标本类型的案例分享 CASE1：2015/11/25 病人：男性 感染科-082床 肺吸虫病 标本：痰 . CD4T淋巴细胞：1/ul ESR：78mm CRP：107mg/L PCT：0.88ug/L * * 在合格的痰标本里发现“有隔菌丝”，是比较有临床意义的！于是把痰标本接种了SDA、血平板。 2天后血平板优势生长出了丝状真菌。 * 2天的血平板棉兰染色，显微镜观察如下图： 因镜下形态曲霉特征明显，但单纯靠血平板和目前所观察到的镜下形态难以鉴定为啥曲霉？随后进行了PDA的转种。 * PDA平板四天时的菌落和镜下形态如下图： 根据菌落和镜下特点，倾向于土曲霉，但菌落颜色因时间的关系，仍不够典型，续孵。 * PDA平板六天时的菌落形态如下图： 典型的泥土色菌落出现， 确定为“土曲霉菌”。 CASE2：肾病科 药物毒性反应 男 编号：1779和1780 连续两次抗酸染色 * 10%NAOH消化痰液后低速离心镜检 * 10%NAOH消化痰液后低速离心镜检 镜下发现的菌丝进行革兰染色 如上图 把两个标本都进行了真菌培养，接种了血平板。 血平板培养48h后，菌落如下： 从平板中可以看出两者是几乎是一样的丝状真菌生长，于是都分别转种了SDA平板。 * 1779 48h * 转种SDA后4d的生长情况 1779 号 1780 号 * 1779 号 当即做了棉兰染色，如上图 烟曲霉菌 简单、常规的工作却需要经验的积累和责任心………. * * 曲霉菌属 曲霉是一类丝状真菌，自然界中广泛存在。常可以再泥土、植物腐物、空气中等处分离到。其引起的人类疾病可分为机会性感染、变态反应性曲霉病及曲霉毒素中毒。 免疫受损是曲霉机会性感染最常见的原因。 感染可以表现为局限性的曲霉球到严重的侵袭性感染。 * 与侵袭性曲霉病发病相关的主要危险因素有： 中性粒细胞及巨噬细胞数量减少或功能异常； 骨髓造血干细胞及实体器官移植、肿瘤放化疗、COPD、ICU机械通气以及长期使用糖皮质激素、细胞毒药物等免疫功能受损的患者。 检验结果的解释： 曲霉菌为条件致病菌，自然界粪便广泛，某些菌可以成为实验室污染菌。因此曲霉菌分离结果需要谨慎对待。结合镜检结果判断培养得到的曲霉是否具有临床意义，一般来说以下几种形式被认为具有临床意义： 1.无菌部位或下呼吸道临床标本中发现菌丝； 2.单一标本中为优势菌或者多次标本中分离得到同一菌株； 3.组织中发现菌丝。 注意：当怀疑肺部真菌感染的时候，最好连续培养三次痰标本。痰液中分离出的曲霉菌则应结合直接镜检结果进行考虑，涂片细胞学检查为合格的痰标本，且初始分离培养基上呈优势生长可作为临床诊断的依据。 * CASE 3 : 2015.12.27 上午10点，患者:张某 “反复腰背疼痛半月，加重伴起卧困难3天”入院。入院前半月，患者无明显诱因开始出现腰背部疼痛，间歇性疼痛，持续时间长短不一，休息后可缓解。既往康健，无不良个人史。辅助检查：MRI显示腰4/5椎间盘突出，腰4椎体失稳，腰椎侧凸畸形。血常规：正常，ESR：31mm/h 27日下午14时，反复高热，最高达39.7℃，送检血培养 28日心内科、感染科会诊：发热待诊。感染性心内膜炎可能性小，不排除血流感染，建议进一步检查。 29日彩超：双侧腋窝查见淋巴结（结构异常）。血PCT：0.43ng/ml HS-CRP：39.18mg/L。 30日，血液科会诊，发热待诊，原因不明，转入血液科，行骨髓穿刺送检，结果正常。 诊断陷入纠结，发热原因何在？感染？非感染？ 接收了血培养的微生物室呢？ * 1.1下午发现仪器报阳（+）进行了常规涂片和转种，但涂片革兰染色：未见细菌。 1.2转种平板未见明显生长。 思考？？？？ 1.血培养瓶4-5天报阳，假阳性？真阳性？ 2.革兰染色未见细菌是真的无菌吗？