吐鲁番果蝇随机扩增DNA多态性初步分析.pdfVIP

79 第 29卷 第 1期 《新疆师范大学学报》(自然科学版) Vo1．29，No．1 2010年 3月 JournalofXi~iangNormalUniversity Mar．2010 (NaturalSciencesEdition) 吐鲁番果蝇随机扩增DNA多态性初步分析 谢红桃 ， 王泽蒲 (新疆师范大学 生命科学与化学学院，新疆 乌鲁木齐 830054) 摘 要：由于吐鲁番地区独特的气候特点，对吐鲁番果蝇和实验室野生型果蝇进行随机引物扩增DNA多态性的初步研 究。结果表明：吐鲁番果蝇与野生型果蝇在DNA水平上的有差异性，并且优化出一种提取果蝇基因组 DNA 的方法 。文章研究的 目的在于探讨吐鲁番果蝇在 DNA水平上的遗传多样性 。 关键词：吐鲁番；果蝇；随机扩增DNA 中图分类号 ：Q933．2 文献标识码： A 文章编号： 1008—9659(2010)01—0079—04 吐鲁番盆地特殊的地理位置及盆地内地形、地势特点形成了其独特的温暖带干旱荒漠气候，主要特点是 干燥、高温、多风。盆地内年 日照时数长，蒸发量大，降水量少。 果蝇是遗传学的经典材料，也成为种群遗传学及进化生态学的重要材料，各种 DNA多态性方法用于果 蝇种内及种间遗传变异的研究中口]，其 中进行随机引物扩增DNA多态性的研究，近年来[9-1¨，广泛被用于 物种鉴别、种群遗传变异及系统演化关系的研究。随着分子生物学的发展，在分子水平上研究物种的进化 已成为近年来进化遗传学研究的一个重要方面。 吐鲁番果蝇有可能是一种新的品种 。我们从 DNA水平上去寻找吐鲁番果蝇与野生型果蝇的差异性 。 这些新品系的发现、选育和利用n]，改变了国内遗传学果蝇实验 中，果蝇杂交长期完全依赖从国外引进 的状 况，为遗传学教学和科研提供 了较好的实验材料 。 1 材料与方法 1．1 样品的采集 2008年 7月到9月，在吐鲁番地区采集并在遗传学实验室25℃恒温箱中培养一段时间的吐鲁番果蝇。 1．2 吐鲁番果蝇的扩繁 1．2．1 培养基制备 采用玉米培养基[1 1．2．2 果蝇的扩大培养 取吐鲁番果蝇和实验室野生型果蝇各 l0对分别于恒温 (25-4-1)℃的恒温培养箱中进行培养。每隔七 天扩繁一次，共扩繁 4次。 1．3 吐鲁番果蝇基因组DNA 的提取及琼脂糖凝胶电泳检测 参照徐书华，曾庆韬果蝇基因组DNA的提取方法[9]。 [收稿 日期]2oO9一o7—15 [作者简介]谢红桃 (1971一)，女，河南封邱人，硕士，讲师，主要从事遗传学方向的研究。 80 新疆师范大学学报(自然科学版) 参照陈燕茹 ，许秀华 ，赵中明琼脂糖凝胶电泳检测 DNA的方法 n]。 1．4 PCR扩增反应及检测[9--11 PCR扩增反应在 PerkinElmerDNAThermalCycler9600型扩增仪上进行．2O条 10bp随机引物 (S1 一 S20)以及所用试剂均为北京生物工程公司产品。 PCR反应总体积为 25gL，其反应体系为 ： PCR缓冲液 (不含氯化镁)×10 2．5uL 氯化镁 (25mmo1) 2 L dNTP(dATP，dCTP ，dGTP，dTTP各 2．5mmo1) ltLL 随机引物 (20mg／L) lgL TaqD2NA聚合酶 (5U／~／L) O．5U 模板 DNA(20--5Ong) ltzL 灭菌三蒸水．