原核与真核生物的DNA复制.ppt

MCB-端粒.MOV ●多点起始 ●从起点向两个相反方向复制 ●复制速度慢 ● RNA引物及冈崎片段的长度均小于原核生物 ● 组蛋白的合成在细胞周期的S期与DNA复制同步 ● 复制完成以前不会发动新一轮复制 ●只有一个复制起点 ●从起点向两个相反方向复制 ●复制的速度快，大约每秒延伸500 bp ● RNA引物和冈崎片段均较长 ● 可以连续发动复制 真核细胞的 DNA合成特点 原核生物DNA复制的调控及其机制 生长条件好 ↓ 合成代谢活跃复制起始因子的浓度快速积累 ↓ 发动连续复制 ↓ 高复制起始频率 真核生物DNA复制的调控 1.细胞周期过程中的调控 一个细胞周期内只进行一次基因组复制 2.染色体水平的调控 不同染色体或同一染色体不同部位的复制子按先后顺序在S期的不同时间复制时间起始复制，其控制因素尚不清楚 对复制的起始，包括复制起始复合物的形成和RNA引物的合成进行调控 3.复制子水平的调控 Cyclins G1 cyclin (cyclin D) S-phase cyclins (cyclins E A) mitotic cyclins (cyclins B A) . Cyclin-dependent kinases (Cdks) G1 Cdk (Cdk4) S-phase Cdk (Cdk2) M-phase Cdk (Cdk1) 细胞周期素依赖蛋白激酶CDK控制复制起始 前复制复合物 pre-replicative complex, pre-RC 进入S期，S-CDK激活pre-RC,引发DNA复制起始（解旋、解链、结合DNA 聚合酶） 前复制复合物在G1期组装，进入S期方可激活 复制许可因子每一周期仅能进入胞核一次 前复制复合物在G1期组装，进入S期方可激活 pre-RC的激活 复制许可因子的调控作用 replication licensing factor ? 是S期CDK的底物，为发动复制所必需 ? 结合于复制起点（ORC的组成分子？） ? 仅可在有丝分裂末期、核膜重组前进入胞核 ? 一旦复制启动，该因子即失活并降解 逆转录与其他复制方式 Reverse Transcription and other types of DNA replication 逆转录酶的发现 ——1975 Nobel Prize 逆转录酶的生物学活性 定义：催化以RNA为模板合成双链DNA的酶（reverse transcriptase） 三种生物活性： RNA为模板的dNTP聚合活性； DNA为模板的dNTP聚合活性； RNAse活性 逆转录酶催化cDNA的形成示意图 RNA依赖的DNA聚合酶 DNA依赖的DNA聚合酶 RNase 逆转录病毒整合基因组示意图 前病毒 provirus 逆转录的生物学意义与实际应用 其他类型的DNA复制方式 噬菌体的滚环复制方式 线粒体的D环复制方式 噬菌体的滚环复制方式 线粒体的D环复制方式 D环复制特征； DNA-polγ参与； RNA引物参与 * * * * * 目录 原核与真核生物的DNA复制 DNA replication in proeukaryotes and eukaryotes 参加DNA复制的重要酶类和蛋白质 DNA 双链解链及保持单链稳定 促进DNA超螺旋结构松弛 合成RNA引物 合成DNA新链 连接冈崎片段　 拓扑异构酶 解链酶 单链结合蛋白 引物酶 DNA聚合酶 DNA连接酶 原核细胞的DNA合成过程 DNA复制的起始 识别起始点 解旋、解链 形成引发复合体（primosome） DNA链的延伸 DNA复制的终止 1. DNA解开成单链，提供模板 2. 合成引物，提供3?-OH末端 复制起点有 结构特征 名? 称 功 能 DnaA蛋白? 辨认复制起始点 DnaB蛋白（解螺旋酶） 解开DNA双链? DnaC蛋白? 协助解螺旋酶 DnaG蛋白 （引物酶） 催化RNA引物生成 SSB? 稳定解开的单链DNA 参与大肠杆菌DNA复制起始的主要蛋白分子 名? 称 功 能 DnaA蛋白? 辨认复制起始点 DnaB蛋白（解螺旋酶） 解开DNA双链? DnaC蛋白? 协助解螺旋酶 DnaG蛋白 （引物酶） 催化RNA引物生成 SSB? 稳定解开的单链DN