Bmi-1基因RNA干扰对人胚纹状体来源神经干细胞衰老的影响.pdfVIP

·746· ·实验研究· Bmi一1基因RNA干扰对人胚纹状体来源 神经干细胞衰老的影响 吴浩陈凌关云谦赵春松陈立华 【摘要】 目的观察原代培养3～4时期的神经干细胞(NSC)经过原癌基因Bmi-1的RNA干 扰(RNAi)后是否发生衰老和衰老后的表象，以及Bmi一1下游基因p16““的表达。方法培养流产 胎儿皮层来源的NSC。经过Bmi．1基因RNA干扰后，检测其衰老情况和细胞增殖能力的改变，以及 其下游基因p16““基因通路的改变。结果体外培养3—4周的NSC增殖旺盛，经过Bmi-1基因 RNA干扰，衰老细胞明显增多，表现为衰老染色阳性的细胞数目从(18．57±2．20)％增加到(33．79 ±7．79)％，但细胞凋亡并无明显增加。与细胞衰老相适应，NSC生长速度变慢，表现为Bmi．1基因 RNA干扰1周后神经干细胞的BrdU掺人率(13．2±4．1)％，明显低于空病毒转染组的(23．1± 5．5)％。此外，干扰后的NSC细胞中Bmi．1基因的转录明显下调至对照组的约40％，而其下游基因 体外培养的人类纹状体神经干细胞中 p16…“基因明显升高到GFP对照组的10倍以上。结论 Bmi．1基因转录水平下降，能够诱发细胞衰老，表现为细胞增殖能力下降。Bmi-l基因下调所引发的 衰老可能和p16““基因转录水平升高有关。 【关键词】纹状体；神经干细胞；衰老；RNA干扰 of interference humanneuralstemceⅡsisolatedfromfetalstri- EffectsBmi．1RNA onsenescenceof atumWU Cell Hao。CHEN‰g。GUAN Chun．song。CHEN of run．qian。ZHA0 Li—hua．Department Institute Medical 100053，China Therapy，8eijingofGeriatrics，XuanwuHospital，CapitalUniversity，Beijing Correspondingauthor：WUHao，Email：rbc612@sina．com AfterBmi．1RNA whetherornothumanfetal 【Abstractl 0bjective interferenee(RNAi)，identify canbe become the of stem striatumderivedneuralstemcell inducedto senescent．observeneural profile cells(NSCs)and the ofdownstream Cuhure quantitativelyanalysisexpression gene。p16““．Methods humanneuralstemcell characterizationofthecellsafterRNAi firstly．The includes：senescence．apoptosis and levelof werealsomeasured．ResultsInaccordalice proliferation．Thetranscn’ptionBmi．1．p16“”8 withtheincreaseofsenescenceidentifiedthe of