mCD99L2基因干扰慢病毒载体的构建与鉴定.pdfVIP

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2018-04-07 发布于北京
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mCD99L2基因干扰慢病毒载体的构建与鉴定.pdf

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·228· 南方医科大学学报(JSouthMed Univ) 2009；29(2) mCD99L2基因干扰慢病毒载体的构建与鉴定理科．2广东省分子肿瘤病理学重点实验室，广东广州510515) CD99 摘要：目的构建mCD99L2(mouseantigen．1ike2)基因RNA干扰慢病毒表达载体，检测其对293FT细胞的感染效率。方法应用基因工程技术，首先设计并合成4对siRNA序列，退火、酶切并连接于慢病毒表达载体SDl259，构建携粒混合物和构建好的慢病毒穿梭质粒共转染293FT细胞，转染48h后收集上清离心过滤，浓缩病毒，利用绿色荧光蛋奇金淋巴瘤町视化细胞模型及动物模型奠定了基础。关键词：慢病毒；mCD99L2；RNA干扰；霍奇金淋巴瘤中图分类号：R363文献标识码：A 文章编号：1673-4254(2009)02．0228．04 andidentificationofarecombinantlentivirus small RNA Construction harboringinterfering mouseCD99 2 targeting antigen—likegene ZHANG Xinl，ZHAO Gong’，LIUFan91，CHENXiao-yanl，FANGWei-yi2，LIHui-lin91，HUANGZuo—pin91，CHUHong-juanl，WANG Tong‘，2 of LabforMolecularTumor of SouthernMedical Province2， DepartmentPathology,NanfangHospitall，Key PathologyGuangdong 51 I 05 University,Guangzhou5，China Toconstructarecombinantlentivirus RNAinterference mouseCD99 Abstract：0bjective harboring sequencetargeting and Four of observeitsinfection of293FTcells．Methods small antigen-like2(mCD99L2)gene efficiency pairs interfering mCD99L2cDNAwere andlinkedtotheientivirusvectorSDI259to designed，synthesized RNAs(siRNAs)targeting constructtheientivirusshuttle 4lentivirusshuttle weretransfectedinto293FTcells plasmids．Aftersequencing，the plasmids inthe of hours