RNA干扰survivin基因对卵巢癌细胞生长凋亡及药物敏感性的影响.pdfVIP

·174· ．基础研究． RNA干扰suⅣivin基因对卵巢癌细胞生长 凋亡及药物敏感性的影响 张欣李宁王益华黄婴徐宁志吴令英 【摘要】 目的 探讨下调8urvi“n基因对卵巢癌顺铂(DDP)耐药细胞株sKoV3／DDP细胞生长、 凋亡及药物敏感性的影响。方法 构建sun，i、，in基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体psilencer- sunrivin，用脂质体方法转染sKOV3／DDP细胞株，另设未转染组和转染pSilencer-con咖l组作为对照。 显微镜下观察转染前后细胞的变化，逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)和we8temblot分别检测8u而“n mRNA及蛋白的表达，二苯基溴化四氮唑蓝(M1，r)法检测细胞生长情况，流式细胞仪检测细胞凋亡及 8urvivin 周期的变化。各组细胞加入DDP，检测其对DDP药物敏感性的影响。结果 siRNA可明显 下调sK0v3／DDP细胞中survivinmRNA及蛋白表达水平。SKOV3／DDP细胞牛长受到明显抑制，生 长曲线低平。转染48h后，转染ps