RNA干扰靶向抑制结缔组织生长因子拮抗肾脏纤维化的发展.pdfVIP

主堡叁途匡堂塑壹垫!Q堡鱼旦箜12鲞筮鱼翅鱼丛』匦疆必：』螋垫!Q：型：12：№：§ ·615· ·基础研究· RNA干扰靶向抑制结缔组织生长因子拮抗 肾脏纤维化的发展 郎明健闵新文李健郭敏杨汉东 【摘要】目的研究RNA干扰靶向抑制结缔组织生长因子(CrGF)对高血压大鼠肾脏纤维化指标 的影响。方法本研究于2006—2008年在武汉协和医院心血管病研究所完成，实验以自发性高血压 大鼠(SHR)为动物模型，随机(随机数字法)分为未干预的SHR组(，l=10)和RNA干扰组(RNAi组， n=lO)，并设置WKY大鼠(托=8)为正常对照组。构建并筛选出靶向大鼠CI|cF的RNAi质粒蕈组 体，通过升主动脉钳夹冠脉灌注法联合尾静脉注射将质粒转染至大鼠体内，RNA干扰结束后，获取肾 脏标本，RT-PCR和Westernblotting检测肾脏组织CIGF及纤维连接蛋白(FN)的mRNA和蛋白表达，免 疫组化技术分析CI_|G下及FN在肾脏的空间表达。0．I％天狼星红一饱和苦味酸胶原染色分析肾组织胶 原类型及代谢水平(以胶原容积分数CVF表示)，比色法测定肾脏组织羟脯氨酸含量