免疫微生物实验课件（汕头大学）肠道细菌.pptVIP

* * * * * 肠道细菌 第5次 肠道杆菌 录像（肠道杆菌的分离鉴定） 肠道杆菌生化反应（糖发酵、吲哚、H2S试验、尿素酶）与培养特点（SS培养基上菌落）（结果示教） 粪便标本中肠道致病菌的分离鉴定（操作，接种双糖铁基） 肠道致病菌的进一步鉴定（玻片凝集，操作） 分 类 埃希菌属Escherichia 志贺菌属Shigella 沙门菌属Salmonella 大肠埃希菌 E. coli 痢疾志贺菌 S. dysenteriae 伤寒沙门菌 S. typhi 其他伤寒沙门菌 肠道杆菌共同特点 G－杆菌，鞭毛＋（除痢疾杆菌） 培养营养要求不高，SS平板可区分致病菌 生化反应活泼（糖发酵） 乳糖发酵鉴别致病菌: + 非致病性，- 致病性 抗原结构复杂 O抗原、H抗原、表面（K、Vi）抗原 易产生耐药性 1、G－杆菌，鞭毛＋（除痢疾杆菌） 2、培养营养要求不高，SS平板可区分致病菌 在普通培养基上生长良好，为中等大小的光滑型菌落。 3. 生化反应活泼 I 吲哚试验 有些细菌可以分解色氨酸生成吲哚可以与二甲基氨基苯甲醛反应生成红色的玫瑰吲哚，因此可根据细菌能否分解色氨酸产生吲哚来鉴定菌种。 M 甲基红试验肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖，在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸，进一步分解中，由于糖代谢的途径不同，可产生乳酸，琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物，可使培养基PH值下降至pH4.5以下，使甲基红指示剂变红。 Vi V.P试验某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中能分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸缩合，脱羧成乙酰甲基甲醇，后者在强碱环境下，被空气中氧氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物 C 柠檬酸实验将试验菌培养在柠檬酸盐培养基斜面上37℃培养24-28小时.观察有无细菌生长与培养基颜色变化.如果含有溴麝香草酚蓝的斜面蓝色者为阳性反应,呈绿色的为阴性反应;含苯酚红的斜面如果呈红色为阳性反应,呈黄色为阴性反应.   H抗原 (鞭毛) O抗原 (菌体抗原，LPS侧链) K或Vi抗原 (荚膜或包膜) 4、抗原结构复杂 5、易产生耐药性 如何从粪便标本中分离鉴别致病性肠道杆菌？ 如何从粪便标本中分离鉴别致病性肠道杆菌？ 粪便标本: 1. 涂片镜检（染色） G- ，中等大小杆菌 2.分离鉴定：接种SS平板或中国蓝平板 接种双糖铁培养基 血清学鉴定 （玻片凝集） 3.血清学诊断：如Widal test等 可疑单个菌落（无色，半透明，小菌落） SS（shigella-salmonella)培养基（选择培养基） 普通培养基 ＋ 乳糖 （乳糖发酵 ） ＋ 指示剂（中性红） ＋ 抑菌剂 （枸橼酸钠（铁），煌绿，胆盐，硫代硫酸钠） ＋：红色（非致病性） －：淡黄色（致病性） 双糖铁培养基 上层斜面：乳糖， 铁剂， 乳糖发酵：＋/- H2S: ＋/- 下层半固体：葡萄糖 动力： ＋/- 葡萄糖发酵：＋/- 指示剂：酚红 酸性：黄色 碱性：红色 肠道杆菌的生化反应（仔细观察示教，填写下表） 痢疾杆菌 尿素 变形杆菌 乙型副伤寒杆菌 甲型副伤寒杆菌 伤寒杆菌 大肠杆菌 吲哚 H2S 动力 葡萄糖 乳糖 IMViC 鉴别大肠杆菌和产气杆菌 3、肠道杆菌的生化反应 - - - - + -/+ 痢疾杆菌 + - - - - 尿素 + ++ + + - 变形杆菌 - ++++ + + - 乙型副伤寒杆菌 - +/- + + - 甲型副伤寒杆菌 - -/+ + + - 伤寒杆菌 + - + + + 大肠杆菌 吲哚 H2S 动力 葡萄糖 乳糖 IMViC 鉴别大肠杆菌和产气杆菌 大肠杆菌 ++--，产气杆菌 --++ * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * *